[發(fā)明專利]病毒樣顆粒的制備方法及其使用的重組桿狀病毒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210194037.3 | 申請日： | 2012-06-13 |
| 公開（公告）號： | CN103320394A | 公開（公告）日： | 2013-09-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 胡育誠;林事曄 | 申請（專利權(quán)）人： | 胡育誠 |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;C12N7/04;A61K39/125;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務(wù)所有限公司 31100 | 代理人： | 陳靜 |
| 地址： | 中國臺灣新*** | 國省代碼： | 中國臺灣;71 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 病毒 顆粒 制備 方法 及其 使用 重組 桿狀病毒 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明關(guān)于微小核糖核酸病毒病毒樣顆粒的制備方法及其使用的重組桿狀病毒，特別是腸病毒病毒樣顆粒的制備方法及其使用的重組桿狀病毒。
背景技術(shù)
腸病毒(Enterovirus)在分類上屬于微小核糖核酸病毒科(Picornaviridae)，為單正股(positive，single?strand)RNA病毒，感染途徑主要經(jīng)由糞便或呼吸道飛沫傳染，能夠感染人體多種系統(tǒng)器官，甚至造成器官功能衰竭的現(xiàn)象。傳統(tǒng)上使用中和血清試驗可將腸病毒分為脊髓灰質(zhì)炎病毒型(Polioviruses，PV)，柯薩奇病毒A型(Coxsackieviruses?A，CAV)，柯薩奇病毒B型(Coxsackie?viruses?2B，CBV)，人類腸道細胞致病性孤兒病毒(Enteric?cytopathogenic?human?orphan?viruses，即伊科病毒Echoviruses)，及68-71型腸病毒等。
由于近年來基因測序方法的進步，腸病毒分類轉(zhuǎn)而分為A-D四種類型，目前共有超過一百種以上的血清型。腸病毒71型(Enterovirus?71，EV71)是目前已發(fā)現(xiàn)至少100種血清型腸病毒當中的一種。根據(jù)其基因分子測序的差異，又可分為A、B、C三群基因型，其中又可細分為A、B1-B5、C1-C5；不同的亞型與其病毒基因演化及地域性相關(guān)。在腸病毒各血清型中，腸病毒71型的致病力特別高，常伴隨著神經(jīng)系統(tǒng)的并發(fā)癥且有致死的可能。
目前常用的傳統(tǒng)疫苗包括滅活疫苗及減毒疫苗，因其作法是將真實病毒以外力方式使抗原決定簇不活化或是降低其毒性，病毒的遺傳物質(zhì)仍然存在于疫苗當中，因此無法完全免除施打疫苗后被感染的機會。病毒樣顆粒(virus-like?particle，VLP)是病毒外殼蛋白質(zhì)所組成的殼狀結(jié)構(gòu)，不含病毒基因體，因此不會有傳染復制的疑慮，使用上較為安全。由于病毒樣顆粒與真實病毒相似，因此進入人體后，可誘發(fā)體內(nèi)的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特定抗體以抵抗真實病毒的侵犯，達到保護的效果。相較于前者，病毒樣顆粒和真實病毒相近的外殼則能保有和真實病毒較相近的抗原決定部位，引發(fā)良好的免疫反應(yīng)以抵抗真實病毒的感染。因此，病毒樣顆粒疫苗為極具潛力的一種疫苗形式。
綜合上述，為有效預防腸病毒，開發(fā)病毒樣顆粒作為疫苗是目前極需努力的目標。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的之一是提供微小核糖核酸病毒病毒樣顆粒的制備方法及其使用的重組桿狀病毒，以改善病毒樣顆粒的穩(wěn)定性及產(chǎn)量。
依據(jù)本發(fā)明一實施例，一種重組桿狀病毒，包括：第一核苷酸序列、第一啟動子、第二核苷酸序列及第二啟動子。第一核苷酸序列用以翻譯成微小核糖核酸病毒的病毒殼蛋白。第一啟動子位于第一核苷酸序列的上游，其中第一啟動子為重組桿狀病毒在昆蟲細胞中表達的強勢啟動子。第二核苷酸序列，其用以翻譯成微小核糖核酸病毒的水解蛋白，水解蛋白用以水解病毒殼蛋白。第二啟動子位于第二核苷酸序列的上游，第二啟動子為重組桿狀病毒在昆蟲細胞中表達的弱勢啟動子。其中，重組桿狀病毒的幾丁質(zhì)酶A(ChiA)基因與v-組織蛋白酶(v-cath)基因為功能損壞。
依據(jù)本發(fā)明的另一實施例，一種病毒樣顆粒的制備方法包括提供上述的重組桿狀病毒，以及以上述的重組桿狀病毒感染昆蟲細胞，以使水解蛋白水解病毒殼蛋白，并產(chǎn)生微小核糖核酸病毒的病毒樣顆粒。
以下藉由具體實施例配合附圖詳加說明，從而更容易了解本發(fā)明的目的、技術(shù)內(nèi)容、特點及其所達成的功效。
附圖說明
圖1A為示意圖，顯示現(xiàn)有技術(shù)及本發(fā)明實施例的重組桿狀病毒。
圖1B-1E顯示本發(fā)明的實驗結(jié)果。
【主要組件符號說明】
Bac-P1-3CD、重組桿狀病毒
Bac-P1-C3CD、
BacF-P1-3CD、
BacF-P1-C3CD、
BacF-P1-I3CD
具體實施方式
本發(fā)明目的之一是提供微小核糖核酸病毒病毒樣顆粒的制備方法及其使用的重組桿狀病毒，以改善病毒樣顆粒的穩(wěn)定性及產(chǎn)量。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于胡育誠，未經(jīng)胡育誠許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201210194037.3/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
