[發明專利]一種同步檢測游離kappa輕鏈和游離lambda輕鏈濃度的新型檢測方法及試劑盒

無效

• 申請號: 201210192629.1
• 申請日: 2012-06-12
• 公開（公告）號: CN102735845A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 盛世樂;王金鳳
• 申請（專利權）人: 上海滬晶生物科技有限公司;上海禾研生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 朱水平;沈利

1.一種用于同步檢測游離kappa輕鏈和游離lambda輕鏈濃度的時間分辨熒光免疫分析的試劑盒，其特征在于，包括以下試劑：

1)同時針對人源抗體重鏈和輕鏈的抗體，

2)用一種鑭系元素標記的抗游離kappa輕鏈抗體，

3)用另一種鑭系元素標記的抗游離lambda輕鏈抗體，

4)游離kappa輕鏈和游離lambda輕鏈的標準品，

5)緩沖液，

6)洗滌液，

7)增強液。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的同時針對人源抗體重鏈和輕鏈的抗體是來自非人源哺乳動物的抗人IgG抗體的多克隆抗體。

3.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的同時針對人源抗體重鏈和輕鏈的抗體為固相抗體；所述固相抗體的固相載體為低熒光本底高吸附反應板。

4.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，試劑2)所述的用一種鑭系元素標記的抗游離kappa輕鏈抗體是來自非人源哺乳動物的抗人游離kappa輕鏈的單克隆抗體或多克隆抗體；試劑3)所述的用另一種鑭系元素標記的抗游離lambda輕鏈抗體是來自非人源哺乳動物的抗人游離lambda輕鏈的單克隆抗體或多克隆抗體。

5.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，試劑4)所述的標準品為游離kappa輕鏈和游離lambda輕鏈的混合標準品。

6.如權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述的混合標準品包括0～600mg/L的所述游離kappa輕鏈與相同濃度的所述游離lambda輕鏈。

7.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的鑭系元素選自銪和釤中的任何一種。

8.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，試劑5)所述的緩沖液為Tris-HCl緩沖液；試劑6)所述的洗滌液為Tris-HCl緩沖液；試劑7)所述的增強液含有β-二酮。

9.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，試劑5)所述的緩沖液為含8mmol/L?NaCl、0.1wt％明膠、0.2wt％IgG、50μmol/L二乙烯三胺五乙酸、0.1ml/L?Tween-80和0.1wt％NaN₃的50mmol/L、pH7.2的Tris-HCl緩沖液；試劑6)所述的洗滌液為含14.5mmol/L?NaCl、0.2ml/L?Tween-80和0.2wt％NaN₃的50mmol/L、pH7.2的Tris-HCl緩沖液；試劑7)所述的增強液為含15μmol/L?β-萘甲酰三氟丙酮、50μmol/L三正辛基氧化膦和0.1(v/v)％TritonX-100的pH為3.2的鄰苯二甲酸氫鉀緩沖液。

10.一種根據如權利要求1～9任一項所述試劑盒同步檢測游離kappa輕鏈和游離lambda輕鏈濃度的時間分辨熒光免疫分析方法，依次包括以下步驟：

1)在包被有同時針對人源抗體重鏈和輕鏈的抗體的固相載體中，加入游離kappa輕鏈和游離lambda輕鏈標準品或待測樣品以及緩沖液，進行孵育；

2)用洗滌液洗滌后，加入用一種鑭系元素標記的抗游離kappa輕鏈抗體和用另一種鑭系元素標記的抗游離lambda輕鏈抗體，進行孵育；

3)用洗滌液洗滌，然后加入增強液進行反應，之后進行時間分辨熒光檢測。