[發明專利]一種止血劑及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210192240.7
• 申請日: 2012-06-12
• 公開（公告）號: CN102727929A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 金明飛;劉明耀;高紅亮;易正芳
• 申請（專利權）人: 華東師范大學
• 主分類號: A61L15/44
• 分類號: A61L15/44;A61L15/32;A61K38/48;A61P7/04;A61K38/39
• 代理公司: 上海麥其知識產權代理事務所(普通合伙) 31257
• 代理人: 董紅曼

技術領域

本發明涉及一種止血材料相關技術領域，具體涉及一種止血劑及其制備方法和應用。

背景技術

現有技術中明膠已經被廣泛用于止血，如強生醫療器材有限公司的Surgiflo?流體明膠，殼聚糖明膠（中國專利申請號：200310121182.X），改性明膠（中國專利申請號：200910244834.6）以及其它用于止血的明膠，如中國專利02121201.5，98117763.8，03126852.8，02104346.9，01142070.7等；美國專利6,652,840，,413,713，6,238,688，6,194,138?5,645,849，4,596,788，4,539,204等。明膠具有止血效果，可以用于外傷或者手術止血。

微生物谷氨酰胺轉胺酶（microbial?transglutaminase，縮寫MTG）與凝血因子FACTOR?XIII屬于同一個家族的酶，很多研究表明了其在凝血反應中的作用。利用MTG可以交聯明膠，形成良好的多空物或者網狀物，例如，它可以交聯I型膠原蛋白形成抗高溫的膠（Nomura?Y,?Toki?S,?Ishii?Y,?Shirai?K.?Biosci?Biotechnol?Biochem.?2001?Apr;65(4):982-5）；MTG與明膠作用形成的膠不會受熱溶解（Chen?T,?Embree?HD,?Brown?EM,?Taylor?MM,?Payne?GF.，Biomaterials.?2003?Aug;24(17):2831-41，美國專利：5,834,232）并可用于細胞固定（Chen?T,?Small?DA,?McDermott?MK,?Bentley?WE,?Payne?GF.，Biomacromolecules.?2003?Nov-Dec;4(6):1558-63），生物支架（Broderick?EP,?O'Halloran?DM,?Rochev?YA,?Griffin?M,?Collighan?RJ,?Pandit?AS.?J?Biomed?Mater?Res?B?Appl?Biomater.?2005?Jan?15;72(1):37-42.；Chen?RN,?Ho?HO,?Sheu?MT.?Biomaterials.?2005?Jul;26(20):4229-35）。用MTG增強明膠的交聯，以提高其強度和黏性，用于制作止血材料、止血敷料或止血用密封材料（McDermott?MK,?Chen?T,?Williams?CM,?Markley?KM,?Payne?GF.?Biomacromolecules.?2004?Jul-Aug;5(4):1270-9；中國專利：200980131973.6和200780051215.4；美國專利：8,133,484；歐洲專利：WO2012017415、WO2011132153、BRPI0718328、ZA200904470、EP2303344、EP2303341及CN102124058）。現有技術所采用的MTG是指將谷氨酰胺酶原（pro-MTG）切除前肽后所獲得的成熟的酶。在通常保存條件下MTG較易失活而不穩定，對溫度比較敏感，不穩定，且必須在較高純度條件下才能發揮交聯作用。

MTG是成熟的酶，是谷氨酰胺酶原（pro-MTG）被切除前肽后所獲得的（Ralf?PASTERNACK,?Simone?DORSCH,?Jens?T.?OTTERBACH,?Isabella?R.?ROBENEK,?Sabine?WOLF?and?Hans-Lothar?FUCHSBAUER，Eur.?J.?Biochem.?257,?5702576?(1998)）。在生物體內發生，能將酶原切割出活性MTG分子的蛋白酶有Streptomyces?albogriseolus來源的SAM-P20、SAM-P26、SAMP45和SAP以及Streptomyces?mobaraensis來源的內源性TG激活酶TAP和Streptomyces?hygroscopicus中的絲氨酸蛋白酶等（Taguchi?S,?Arakawa?K,?Yokoyama?K,?et?al.?J?Biosci?Bioeng,?2002,94(5):478-81.?Zhang?D,?Wang?M,?Wu?J,?et?al.?J?Agric?Food?Chem,?2008,56(21):10261-4.）。但上述反應不能被用于成熟MTG的工業應用。