[發明專利]N-乙酰半胱氨酸對中央記憶性T細胞的絕對數量在體外擴增上的應用

無效

• 申請號: 201210190355.2
• 申請日: 2012-06-11
• 公開（公告）號: CN102732480A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 張輝;武雙鑫;羅海華;劉超
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783
• 代理公司: 廣州致信偉盛知識產權代理有限公司 44253
• 代理人: 李東來

1.N-乙酰半胱氨酸對中央記憶性T細胞的絕對數量在體外擴增上的應用。

2.根據權利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸對中央記憶性T細胞的絕對數量在體外擴增上的應用，其特征在于，所述中央記憶性T細胞為CD4⁺?T或CD8⁺T細胞。

3.根據權利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸對中央記憶性T細胞的絕對數量在體外擴增上的應用，其特征在于，所述N-乙酰半胱氨酸的濃度為1?mmol/L~10?mmol/L。

4.根據權利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸對中央記憶性T細胞的絕對數量在體外擴增上的應用，其特征在于，所述T細胞的提取方法是先將外周成分血與含2%?BSA和0.5%?EDTA的PBS按1:4混合均勻；然后將稀釋后的血液緩慢加入淋巴細胞分離液的上方，二者的比例為1:1；離心300×g?30?min；小心吸取單核細胞，置入另一離心管中，加入5倍體積的含0.5%?BSA和2%?EDTA?的PBS稀釋，混合均勻后，300×g?15?min；重復上一步驟一次；孵育CD4⁺?T或CD8⁺T細胞陰選一抗，15?min；用10倍體積的含0.5%?BSA和2%?EDTA?的PBS稀釋，混合均勻后，300×g?12?min；孵育帶有磁珠的二抗，30?min；過柱進行細胞分選，得到CD4⁺?T或CD8⁺T細胞。

5.根據權利要求1所述的N-乙酰半胱氨酸對中央記憶性T細胞的絕對數量在體外擴增上的應用，其特征在于，所述T細胞的培養方法是在5%?CO₂、飽和濕度及37^oC條件下將5×10⁵個/孔的CD4⁺?T或CD8⁺T細胞置于1?mL含10%胎牛血清的RPMI1640中培養。