[發明專利]檢測自身免疫性肝病相關抗體ANA的試劑盒及其檢測方法

無效

• 申請號: 201210190232.9
• 申請日: 2012-06-11
• 公開（公告）號: CN102955030A
• 公開（公告）日: 2013-03-06
• 發明（設計）人: 張學東;于林;何麗;楊皓宇;吳學煒;付光宇;司國權;李掌印;馬建軍;劉功成;項立紅;渠海;李桂林
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖綠科生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/576
• 分類號: G01N33/576;G01N21/76
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

1.一種檢測自身免疫性肝病相關抗體ANA的試劑盒，包括固相載體，酶標二抗工作液，陽性對照品，陰性對照品，樣品稀釋液，底物和洗滌液，其特征在于：所述固相載體為固定有抗核抗體靶抗原的微孔板、磁微粒或磁球；所述酶標二抗工作液中所用二抗為鼠或兔或羊抗人IgG或/和抗人IgM或/和抗人IgA，所用二抗標記物為辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、吖啶酯、異魯米諾或稀土元素。

2.根據權利要求1所述的檢測自身免疫性肝病相關抗體ANA的試劑盒，其特征在于：所述樣品稀釋液由濃度小于10%的氯化鈉緩沖液和小于1%保護蛋白組成。

3.根據權利要求2所述的檢測自身免疫性肝病相關抗體ANA的試劑盒，其特征在于：所述保護蛋白為酪蛋白、白蛋白、蛋白胨、明膠、動物血清或人血清。

4.根據權利要求1所述的檢測自身免疫性肝病相關抗體ANA的試劑盒，其特征在于：所述靶抗原為天然抗原、重組抗原、合成肽、HepG2細胞、Hep2細胞、Hela細胞或細胞裂解抗原。

5.根據權利要求1所述的檢測自身免疫性肝病相關抗體ANA的試劑盒，其特征在于：所述底物為發光底物或顯色底物。

6.根據權利要求5所述的檢測自身免疫性肝病相關抗體ANA的試劑盒，其特征在于：所述發光底物為發光底物A和發光底物B，所述發光底物A由0.2M?Tris-HCl、0.15mM?Luminol、0.59mM羥基香豆素、0.35mM沒食子酸組成；所述發光底物B由0.85mM氨基酸氧化酶、0.8%Tween?20、?0.5mM?DTPA、0.12mM維生素C組成。

7.如權利要求1所述試劑盒的檢測方法，其特征在于：包括下述步驟：

第一步，將待檢測血清用樣品稀釋液稀釋成血清樣本，分別將陽性對照品、陰性對照品、校準品和血清樣本加入到固相載體中孵育；

第二步，樣本反應結束后，棄去反應液，用洗滌液洗板；

第三步，將酶標二抗工作液加入每一反應孔中，孵育；

第四步，反應結束后，棄去反應液，用洗滌液洗板；

第五步，加入底物檢測，儀器檢測信號值來定性或定量判斷樣本中被測抗體，或通過免疫層析或免疫滲濾法肉眼或儀器讀取樣本定性或定量結果。