[發明專利]一種從九里香莖葉中提取總黃酮的方法

無效

• 申請號: 201210187890.2
• 申請日: 2012-06-07
• 公開（公告）號: CN102669195A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 曹陽;駱焱平;王蘭英
• 申請（專利權）人: 海南大學
• 主分類號: A01N65/36
• 分類號: A01N65/36;A01P7/04
• 代理公司: 海口興南知識產權事務有限公司 46002
• 代理人: 林尤懷

技術領域

本發明涉及一種從植物中提取總黃酮的方法，屬于農藥技術領域，具體地講是涉及一種從九里香莖葉中提取總黃酮的方法。

背景技術

九里香[Murraya?paniculata?(L.)]屬蕓香科(Rutaceae)?九里香屬植物，別名千里香、滿山香、七里香等。該屬植物全世界約14種及2變種。其中亞洲熱帶及亞熱帶地區約有12種，我國有8種及1變種，主要產自中國云南、貴州、湖南、廣東、廣西、海南、福建、臺灣等地。九里香是我國十大名花之一，也是一種中藥材，現代藥理研究表明，九里香具有抗生育和終止妊娠、抗菌消炎、降血糖、抗痙攣及局部麻醉等作用。近年農用活性研究表明，九里香粗提物具有較好的殺蟲活性（湖北農業科學，2005；農藥，2011；西北農業學報，2011）。

到目前為止，國內外學者已從本屬植物中分離到10余種黃酮類化合物。分別為3',4',?5,?5',7,8-六甲氧基黃酮，命名為版納九里香素(bannamurpanisin)。從九里香葉中分離得到5,7,3′,4′-四甲氧基黃酮、5,7,3′,4′,5′-五甲氧基黃酮和5,6,7,3′,4′,5′-六甲氧基黃酮、5,6,7,3′,4′-五甲氧基黃酮、5-羥基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黃酮、5,7,8,3′,4′-五甲氧基二氫黃酮、7-羥基-5,3′,4′-三甲氧基黃酮、3′,5-二羥基-7,4′-二甲氧基黃酮。從九里香果實中分得兩個新的黃酮類化合物5-羥基-3,7,8,3′,4′,5′-六甲氧基黃酮，8-羥基-3,5,7,3′,4′,5′-六甲氧基黃酮等。

專利《千里香葉總黃酮及其制備方法及用途，申請號200710147357.2》中，涉及到黃酮的提取方法，該方法使用大孔樹脂、Al₂O₃柱、硅膠柱反復層析得到總黃酮。由于該專利提取總黃酮的過程復雜，不適合于工業化生產；且需要消耗大量有機溶劑，對環境有一定影響。加之九里香具有重要的藥理和農用活性，為此，選擇簡便快捷的提取方法具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種從九里香莖葉中簡便提取總黃酮的方法，以及總黃酮顯著的殺蟲活性，有利開發成植物源農藥。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案如下：

一種從九里香莖葉中提取總黃酮的方法，其特征在于采用如下具體工藝步驟：

a.采摘九里香枝葉，自然晾干，粉碎，過40目篩，得九里香粉末；

b.將九里香粉末浸泡在50-95％乙醇中5-7天，乙醇用量為九里香粉末重量的10-20倍，隨后進行超聲波提取30-60分鐘；

c.減壓抽濾，得濾液，加入濾液總量2-4％的脫色劑脫色，過濾，濾液減壓濃縮至原來的1/10-1/20，溫度控制在50-60℃，回收乙醇；

d.向上述濃縮液中加入其重量3-5倍的自來水，在超聲波上震蕩，溫度控制在40-60℃，時間30-60分鐘；

e.過濾，除去不溶物，濾液緩慢加入大孔樹脂內，大孔樹脂用量為九里香粉末重量的1-1.5倍，使用20倍柱體積的自來水洗脫；再用10-20％乙醇洗脫，使用AlCl₃為顯色劑，檢測洗脫液，直到流出物呈現陽性；改用50-75％乙醇洗脫，使用AlCl₃為顯色劑，檢測洗脫液，直到流出物呈現陰性；

f.減壓濃縮50-75％乙醇的洗脫液，真空干燥得到總黃酮；

g.以蘆丁為標準對照，用紫外分光光度法測定總黃酮含量在50％以上。

所述脫色劑選用硅燥土、白炭黑或活性炭。

所述大孔樹脂選用D101大孔樹脂、D140大孔樹脂、AB-8大孔樹脂或XAD16大孔樹脂。

所述自來水的pH值為5-7。

本發明具體具有以下優點：

1、九里香原料來源方便。九里香在南方作為園林綠化植物，每年經過修枝整葉，將去除大量枝葉，為九里香黃酮提取提供大量原材料。

2、提取方法簡單，適合于工業化生產。本案例采用乙醇滲漉提取，大孔樹脂梯度洗脫分離黃酮化合物，操作流程簡便，使用設備簡單，洗脫劑常見，可以進行工業化生產。

3、節能環保。所用溶劑包含乙醇，可以回收利用，大孔樹脂經活化后可以反復使用。

具體實施方法

下面結合優選實施例對本發明作進一步詳細說明，但本發明決不限于下述實施例。

實施例1

一種從九里香莖葉中提取總黃酮的方法，其具體工藝步驟如下：

a.采摘九里香枝葉，自然晾干，粉碎，過40目篩，得九里香粉末；