[發明專利]一種長匍莖樹發素的提取分離方法

無效

• 申請號: 201210184568.4
• 申請日: 2012-06-07
• 公開（公告）號: CN102690276A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，公開了一種長匍莖樹發素的提取分離方法。

背景技術

長匍莖樹發素，為苯并呋喃類化合物，無色針晶，mp.291℃。分子式為C₁₅H₁₀O₆，分子量為286.24。結構式：

。

長匍莖樹發素具有抗菌活性。對革蘭陽性菌有弱抗菌活性。對金黃色葡萄球菌和包皮垢分支桿菌在25μg/mL時，有抗菌活性。

長匍莖樹發素來源于松蘿科(Usneaceae)長匐莖樹發Alectoria?sarmentosa?Ach.目前對長匍莖樹發素的研究較少，因此提供一種簡便且易于工業化生產長匍莖樹發素的方法具有重要的意義，為長匍莖樹發素的開發研究奠定了基礎。

發明內容

本發明的目的是提供一種長匍莖樹發素的提取分離方法，具體來說，是采用柱層析和高速逆流色譜結合的方法制備長匍莖樹發素。

本發明所述的一種長匍莖樹發素的提取分離方法，其特征在于包含以下步驟：

（1）提取：以長匍莖樹發為原料，置于萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，萃取壓力為20-40MPa，萃取溫度為30-55℃，解析壓力為6-10MPa，解析溫度為25-45℃，萃取1-4h，得到長匍莖樹發素粗提物；

（2）柱層析：粗提物用氯仿溶解，用硅膠拌樣，揮干氯仿，上中壓硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，收集目標流分；

（3）高速逆流色譜：將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，收集高濃度流分；

（4）結晶：將高濃度流分減壓濃縮，放置結晶，真空干燥，得到針晶。

所述步驟（1）中CO₂流量為20-60kg/h。

所述步驟（2）中硅膠為100-300目，柱徑高比為1:7-15，壓力控制在0.6-0.9MPa，石油醚-乙酸乙酯體積比為4:1-15。

所述步驟（3）正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水體積比為3-6:4-7:5-9:3。

本發明的積極效果為：本發明制備的長匍莖樹發素純度高、樣品損失少、制備量大，易于實現工業化生產。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1：

以長匍莖樹發為原料，取1kg，粉碎，置于萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，CO₂流量為20kg/h，萃取壓力為20MPa，萃取溫度為35℃，解析壓力為10MPa，解析溫度為25℃，萃取1h，得到長匍莖樹發素粗提物，用氯仿溶解，用硅膠拌樣，硅膠為100目，揮干氯仿，上中壓硅膠柱層析，柱徑高比為1:7，壓力控制在0.6MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液4:1、1:1、1:4、1:10、1:15梯度洗脫，收集目標流分，將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，體積比為3:4:5:3，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結晶，真空干燥，得到長匍莖樹發素針晶，含量99.3%。

實施例2：

以長匍莖樹發為原料，取1kg，粉碎，置于萃取釜中，進行超臨界二氧化碳萃取，CO₂流量為60kg/h，萃取壓力為40MPa，萃取溫度為30℃，解析壓力為6MPa，解析溫度為45℃，萃取4h，得到長匍莖樹發素粗提物，用氯仿溶解，用硅膠拌樣，硅膠為300目，揮干氯仿，上中壓硅膠柱層析，柱徑高比為1:15，壓力控制在0.9MPa，石油醚-乙酸乙酯混合溶液4:1、1:1、1:4、1:10、1:15梯度洗脫，收集目標流分，將目標流分濃縮，注入高速逆流色譜儀，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑體系，體積比為6:7:9:3，上相為固定相，下相為流動相，紫外在線監測，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結晶，真空干燥，得到長匍莖樹發素針晶，含量97.5%。

實施例3：