[發明專利]從黃芪中同時提取和分離黃酮富集物、皂苷富集物和多糖的方法

有效

• 申請號: 201210178208.3
• 申請日: 2012-06-01
• 公開（公告）號: CN102697838A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 池汝安;鐘玲;張越非;肖春橋;徐志高;余軍霞
• 申請（專利權）人: 武漢工程大學
• 主分類號: A61K36/481
• 分類號: A61K36/481;A61P39/06;A61P1/16;A61P29/00;A61P9/00;A61P37/02;A61P9/10;A61P31/12;A61P35/00;A61P19/02;A61P37/04;A61P9/04;A61P9/12
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 崔友明

技術領域

本發明涉及一種中草藥有效成分的提取方法，尤其涉及一種從黃芪中同時提取和分離黃酮富集物、皂苷富集物和多糖的方法。

背景技術

黃芪是名貴中藥，屬補氣藥，具有補氣升陽、益胃固表、利水消腫、脫毒生肌等功效。黃芪為豆科植物蒙古黃芪(Astragalus?membranaceus)?或膜莢黃芪(Astragalus?membranaceus)的干燥根，具有補氣固表、利尿托毒、排膿、斂瘡生肌等功效。黃芪中的主要有效成分為黃酮類、皂苷類和多糖。其中黃酮類化合物主要包括芒柄花素(?formononetin)、芒柄花苷(ononion)、毛蕊異黃酮(calycosin?)及其糖苷等。研究證實黃芪總黃酮具有清除O^2-·和OH-·防止生物膜過氧化的作用，也能顯著抑制OH-·對DNA的損傷作用，是黃芪抗氧化作用的主要成分，表現為顯著的抗肝臟毒性、抗炎、抗菌及保護心血管系統的作用。黃芪總皂苷在免疫調節、心肌缺血保護等方面有顯著活性，其藥理作用廣泛，包括抗病毒、保肝、抑瘤、改善心臟功能、抗炎鎮痛、抑制滑膜成纖維細胞增殖等。黃芪多糖具有廣泛的生物活性，在醫學和獸醫臨床上研究應用也較廣泛，可作為免疫促進劑或調節劑。大量體內外實驗及臨床研究表明，黃芪多糖具有增強機體免疫功能、強心降壓、降血糖、抗應激、抗腫瘤、抗病毒、抗輻射、抗氧化等多種藥理功效。

現有文獻雖然報道了較為詳細的將黃芪中部分有效成分進行分離的方法，但同樣也沒有一個將多糖、黃酮類化合物和皂苷類化合物從黃芪中同時進行分離和富集的過程。

發明內容

?本發明所要解決的技術問題是針對上述現有技術而提供一種從黃芪中同時提取和分離黃酮富集物、皂苷富集物和多糖的方法，其工藝簡單、成本低、損失小和產品質量高。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案是：從黃芪中同時提取和分離黃酮富集物、皂苷富集物和多糖的方法，包括以下步驟：

1）將黃芪根莖原料粉碎過20-60目篩后放入容器，加入乙醇提取，在50~90℃下回流提取1~5小時，反復提取2-3次，過濾藥渣后，合并得到乙醇提取液；

2）乙醇提取液冷卻至室溫，靜置2~7天，有沉淀物A析出，過濾得到沉淀物A和乙醇提取液過濾液；

3）待步驟1）所得藥渣揮去溶劑之后用水提取1~5小時，反復提取2-3次，過濾藥渣后，合并得到水提取液，旋轉蒸發濃縮后，得到水提濃縮液；

4）步驟3）所得水提濃縮液用乙醇醇沉，過濾得到的沉淀物B與沉淀物A合并，真空干燥研磨成粉，即得到黃芪多糖富集物；

5）將步驟2）的乙醇提取液過濾液和步驟4）過濾所得的過濾液合并，攪拌下加入堿液，離心分離，得到黃色粘稠沉淀C；

6）將步驟5）離心分離得到的清液進行蒸餾回收有機溶劑，濃縮后的母液室溫放置沉降，離心得到淡黃色沉淀D，通過蒸餾水水洗該沉淀3-5次后，將其真空干燥研磨成粉，得到黃芪總皂苷富集物；

7）將步驟5）所得黃色粘稠沉淀C加酸液酸化，至不再沉出物質為止，離心分離，所得沉淀物經水洗后，將其真空干燥研磨成粉，即得到黃芪總黃酮富集物。

按上述方案，步驟1）所述的乙醇濃度是50~95.wt%。

按上述方案，步驟1）所述的黃芪根莖與乙醇的投料比為1g∶5~30ml，步驟3）所述的揮去溶劑之后的藥渣與水的投料比為1g∶5~30ml。

按上述方案，步驟4）所述的乙醇濃度為50~100.wt%。

按上述方案，步驟3）所述的旋轉蒸發濃縮蒸發后體積為水提取液原體積的1/2~1/10，步驟6）所述的濃縮后母液體積為清液原體積的1/2~1/10。

按上述方案，步驟5）所述的堿液為NaOH、Ca(OH)₂或KOH以控制pH為8~10。

按上述方案，步驟7）所述的酸液為鹽酸、硫酸或醋酸以控制pH為3~5。

本發明的反應機理是采用固液萃取將固體混合物浸在選定的溶劑中，利用其組分在溶劑中的不同溶解度，使易溶的組分溶解為溶液，即可達到不同機型物質與固體殘渣的分離。

本發明使用堿沉淀法將黃酮類和皂苷類化合物進行分離和富集時，所用堿液濃度不宜過高，以免在強堿性下，尤其加熱進破壞黃酮母核。在加酸酸化時，酸性也不宜過強，以免生成????????????????????????????????????????????????鹽，致使析出的黃酮類化合物又重新溶解，降低產品收率。

本發明所得產品的分析方法：

1、黃芪總黃酮的含量測定