[發(fā)明專利]一株短乳桿菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210177785.0
• 申請(qǐng)日: 2012-05-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102690768A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-09-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳堅(jiān);楊娟;方芳;堵國(guó)成
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A61K8/99;A61Q11/00;C12R1/24
• 代理公司: 北京匯信合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11335
• 代理人: 王秀麗

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株短乳桿菌及其應(yīng)用，特別是一株分離自口腔的具有益生特性的短乳桿菌，能產(chǎn)生保外多糖、過(guò)氧化氫及抑制口腔致病菌生長(zhǎng)的短乳桿菌。?

背景技術(shù)

聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織將益生菌定義為一種具有生物活性的微生物，當(dāng)給予人體適當(dāng)劑量后對(duì)人體的健康有益。益生菌的種類繁多，最常見(jiàn)的兩大類益生菌分別是乳酸桿菌類和雙歧桿菌類。?

隨著抗生素過(guò)度使用和細(xì)菌耐藥問(wèn)題的日益加劇，益生菌在防治和緩解感染、炎癥及過(guò)敏性疾病方面的優(yōu)勢(shì)越來(lái)越明顯。大量的研究證實(shí)益生菌能用于治療口咽感染、消化道疾病、泌尿生殖系統(tǒng)感染等疾病。近幾年來(lái)益生菌療法也逐漸應(yīng)用到口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。臨床上常見(jiàn)的口腔疾病如齲齒、牙周炎和口臭等，都與某些致病菌或?qū)谇唤】挡焕奈⑸镌诳谇恢械倪^(guò)量生長(zhǎng)有關(guān)。益生菌療法不僅可以有效抑制致病菌的生長(zhǎng)，同時(shí)還能幫助維持正常的口腔微生態(tài)菌群，保障口腔健康。有研究表明長(zhǎng)期攝入添加鼠李糖乳桿菌牛奶的兒童，齲病發(fā)生率較低，這是由于具有益生性的鼠李糖乳桿菌能夠抑制齲齒致病菌變異鏈球菌的生長(zhǎng)，減少口腔環(huán)境中變異鏈球菌數(shù)量，降低齲病發(fā)生率。也有研究采用益生乳桿菌制備治療牙齦出血及牙齦炎等藥物來(lái)解決口腔問(wèn)題。?

口腔環(huán)境中定植有各種各樣的微生物，這些微生物通過(guò)共生競(jìng)爭(zhēng)拮抗等作用，構(gòu)成了復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)。口腔益生菌在這個(gè)生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)揮作用的前提之一是能夠與口腔中其他微生物共聚集及形成生物膜。此外，通過(guò)分泌過(guò)氧化氫、細(xì)菌素、有機(jī)酸等多種抗菌物質(zhì)來(lái)抑制病原菌的生長(zhǎng)也是微生物作為口腔益生菌的篩選原則。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一株短乳桿菌（Lactobacillus?brevis）BBE-Y52，于2012年5月9日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC?No：M?2012162。?

本發(fā)明提供了一株口腔短乳桿菌，具有產(chǎn)胞外多糖、產(chǎn)過(guò)氧化氫和抑制變異鏈球菌及空腸彎曲桿菌生長(zhǎng)的益生特性。?

所述短乳桿菌分離自口腔健康志愿者的牙菌斑。其培養(yǎng)和保藏條件如下：從生長(zhǎng)良好的平?板上挑取單菌落接入MRS培養(yǎng)基中，在37°C（5%CO₂）培養(yǎng)24h后保藏于-80°C冰箱。?

所述短乳桿菌產(chǎn)胞外多糖的培養(yǎng)條件是將其接種于含有10%（w/v）蔗糖的MRS培養(yǎng)基中，在30°C靜置培養(yǎng)48h。短乳桿菌所產(chǎn)游離的胞外多糖使用苯酚-硫酸法測(cè)定。?

短乳桿菌產(chǎn)過(guò)氧化氫的培養(yǎng)條件是將其接種到MRS培養(yǎng)基中，37°C?5%?CO₂培養(yǎng)24h，用過(guò)氧化物試紙條檢測(cè)發(fā)酵液中過(guò)氧化氫的含量。?

研究短乳桿菌抑制變異鏈球菌和空腸彎曲桿菌的生長(zhǎng)采用牛津杯法。?

本發(fā)明提供的短乳桿菌（Lactobacillus?brevisBBE-Y52），能抑制變異鏈球菌及其他口腔微生物的生長(zhǎng)；能產(chǎn)胞外多糖，為乳酸菌在口腔環(huán)境中與其他微生物共聚集及生物膜的形成提供了必要的條件；還能產(chǎn)過(guò)氧化氫，具有殺菌美白牙齒的作用。短乳桿菌可以用來(lái)解決常見(jiàn)的口腔問(wèn)題，保障口腔健康。?

生物材料：?

本發(fā)明獲得一株短乳桿菌（Lactobacillus?brevis）BBE-Y52，于2012年5月9日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC?No：M?2012162。?

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：口腔乳桿菌的分離?

將唾液和牙菌斑樣品稀釋涂布在MRS固體培養(yǎng)基上（pH?5.5），在37°C（5%CO₂）培養(yǎng)24h。挑選革蘭氏陽(yáng)性的桿菌進(jìn)行劃線分離和保藏。?

實(shí)施例2：口腔益生乳桿菌的篩選及其益生特性?

對(duì)口腔益生乳桿菌的篩選及特性考察包括產(chǎn)胞外多糖、產(chǎn)過(guò)氧化氫和抑制三株典型的口腔微生物的生長(zhǎng)。?