[發明專利]一種水葫蘆生防真菌擬盤多毛孢

有效

• 申請號: 201210175725.5
• 申請日: 2012-05-31
• 公開（公告）號: CN102660468A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 胡麗;譚萬忠
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01P13/02;C12R1/645
• 代理公司: 重慶弘旭專利代理有限責任公司 50209
• 代理人: 周韶紅

技術領域

本發明屬于雜草生物防治技術領域，特別是涉及一種水葫蘆生防真菌擬盤多毛孢(Pestalotiopsis?crassipes)菌株。

背景技術

水葫蘆(Eichhornia?crassipes)又稱鳳眼蓮，是世界十大害草之一，也是我國重要的外來入侵植物之一。廣泛分布于亞洲、北美、大洋州和非洲的很多國家和地區。水葫蘆于20世紀30年代傳入我國，目前廣泛分布在華南、華中和華東等地區，尤其以云南、四川、湖南、湖北、江西、江蘇、浙江、福建和臺灣等省市。該草適應性極強、生長速度很快、蔓延速度驚人,過度繁殖后難以有效控制,帶來嚴重的水環境生態破壞和生物污染。

目前水葫蘆主要通過人工機械打撈、化學除草和生物防除控制。但人工打撈只能在短時間、小范圍內起作用，而且費時費力。機械攪滅，受地域限制，成本高，不適合推廣，而且打撈的水葫蘆若不及時處理，蚊蟲滋生，也會嚴重影響環境和人畜健康。化學除草劑不僅費用高，而且可能直接造成環境污染。因此近年來“應用植物病菌控制水葫蘆”的生物防治研究受到人們的高度關注，國外已經報道了70多種水葫蘆致病真菌,?其中有7種強致病菌株具有開發成水葫蘆真菌除草劑的生防應用潛力。羅得曼尼尾孢(Cercospora?rodmanii)?防除水葫蘆在國外已獲專利保護。在我國已報道十余種水葫蘆致病真菌，其中水葫蘆一種假鏈格孢(Nimbya?alternantherae?SF193菌株)已獲我國專利保護(專利號:?200710019832)，迄今還沒有關于其它幾種病菌的進一步研究和應用的詳細報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種對水葫蘆有很強致病作用和控制效果的殺草真菌。根據形態學特征和分子生物學手段將其鑒定為擬盤多毛孢菌(Pestalotiopsis?photiniae)，通過試驗測定確定了它生長、產孢和侵染致病的最適條件，研究發現其通過產生毒素使雜草植株發病死亡的致病機理，分析了病菌及其毒素的寄主專化性。

水葫蘆強致病菌株分離純化：在重慶地區不同季節多次采集水葫蘆自然發病植株，采用馬鈴薯蔗糖瓊脂培養基(PDA)，經室內組織培養和純化得到多種真菌，用柯赫氏證病方法確定其中的致病菌，最后經過致病性試驗比較篩選，獲得了這種對水葫蘆有很強致病作用的殺草病原真菌(WH010)。

本發明的水葫蘆擬盤多毛孢菌株(WH010)已于2010年12月8日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號：CGMCC?NO.4418。

菌株的形態特征(圖1)鑒定：在PDA培養基上25?℃培養5?d菌落(圖1A)直徑可達64?mm以上，光照與黑暗對病菌生長產孢沒有明顯的影響。病菌菌落圓形，表面氣生菌絲較發達，白色，短絮狀，呈輻射狀擴展；菌絲(圖1C)無色，分隔，直徑約1.3-2.7?μm。14-15?d后菌落表面長出黑色油圓球狀或不規則狀、具光澤而濕潤的分生孢子堆，呈放射狀分布；隨培養時間延長，分子孢子堆大量產生，有的在菌落表面聯合成片。

分生孢子(圖1D)紡錘形或倒棍棒狀，大小為14.2-28.5×4.1-7.8?μm，直或稍微彎曲，5?個細胞，各細胞之間分隔均為真隔膜，兩端細胞壁薄，無色，中間3?個細胞呈橄欖褐色，色澤一致；頂部細胞無色，圓錐形，比次頂部細胞直徑明顯變小，頂端附屬絲2-3條，基部細胞無色倒圓錐形，中生式尾毛1根，約為附屬絲長度的1/4。

分生孢子梗較短，著生于分生孢子盤基部，無色或淺褐色，分隔，不規則分枝。

對病組織進行切片可見分生孢子盤杯狀，散生或集生，初埋生后外露，黑色或暗褐色底層由厚壁、角狀、暗褐色細胞構成，盤表面產孢區細胞壁薄，色淡。

根據病菌的這些形態學特征鑒定，其無性階段屬于擬盤多毛孢屬真菌(Pestalotiopsis?sp.)，實驗中未發現其有性階段。