[發(fā)明專利]冬蟲夏草中國被毛孢合成代謝嘌呤的酶、基因及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210175456.2
• 申請日: 2012-05-28
• 公開（公告）號: CN102747057A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭裕國;李邦良;吳暉;柳志強(qiáng);許靜;陳麗芳;許峰;薛亞平;袁水金;王鴻艷
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué);杭州中美華東制藥有限公司
• 主分類號: C12N9/24
• 分類號: C12N9/24;C12N15/56;C12P17/18;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19;C12R1/645
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

（一）技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一個來自“百令”生產(chǎn)菌冬蟲夏草中國被毛孢的參與嘌呤核苷出發(fā)合成代謝嘌呤的嘌呤核苷酶（purine?nucleaosidase），編碼這個酶的基因及其應(yīng)用。

（二）背景技術(shù)

冬蟲夏草（Cordyceps?sinensis(Berk.)Sacc.）是冬蟲夏草菌寄生在鱗翅目（Lepidoptera）蝙蝠蛾科昆蟲（Hepialus?armoricanus?Oberthur）幼蟲上的子座及幼蟲尸體上的復(fù)合體（包括子座和蟲體）。冬蟲夏草是一類珍惜的傳統(tǒng)真菌藥材資源，具有代謝產(chǎn)物和生物活性多樣的特點(diǎn)，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用和發(fā)展前景。冬蟲夏草以其多種藥用功效廣泛、明顯而備受關(guān)注，在世界范圍內(nèi)備受推崇。中醫(yī)認(rèn)為，冬蟲夏草入肺腎二經(jīng)，既能補(bǔ)肺陰，又能補(bǔ)腎陽，主治腎虛，陽痿遺精，腰膝酸痛，病后虛弱，久咳虛弱，勞咳痰血，自汗盜汗等，是唯一的一種能同時平衡、調(diào)節(jié)陰陽的中藥?，F(xiàn)代藥理學(xué)已證實(shí)，冬蟲夏草具有免疫調(diào)節(jié)、抗菌、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、降血糖血脂、性激素樣作用等廣泛的生物活性。

冬蟲夏草菌是一種子囊菌，在其生活史中具有分生孢子階段（無性型）和子囊孢子階段（有性型）。而在人工培養(yǎng)、液體發(fā)酵等實(shí)際生產(chǎn)中使用的是無性階段的冬蟲夏草菌，因而冬蟲夏草無性型的鑒定非常重要。國內(nèi)外學(xué)者在冬蟲夏草資源調(diào)查、無性型確證、活性成分分離分析和作用機(jī)理、開發(fā)應(yīng)用方面做了大量工作。冬蟲夏草中國被毛孢已被證明是冬蟲夏草的無性型存在形式，具有與天然冬蟲夏草相同的活性成分和藥效。

天然蟲草具有嚴(yán)格的寄生性以及特殊的生態(tài)環(huán)境，故其產(chǎn)量很低，價格高昂。野生冬蟲夏草由于受生長環(huán)境等因素制約，資源匱乏。由于近幾年在人工栽培上進(jìn)展不大，野生冬蟲夏草代用品研究多集中在液體發(fā)酵上。利用液體深層發(fā)酵培養(yǎng)冬蟲夏草菌絲體、提取物或發(fā)酵液,是解決冬蟲夏草藥源的一種有效途徑。蟲草發(fā)酵生產(chǎn)蟲草替代品，既可有效保護(hù)蟲草這一珍貴資源，又不受氣候、地理環(huán)境和蟲草寄生條件嚴(yán)格的限制，適合于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。生產(chǎn)出的替代品如菌絲體其成分和藥效也與天然蟲草相似，因而國內(nèi)外一直致力于蟲草菌絲體的發(fā)酵培養(yǎng)。人工發(fā)酵培養(yǎng)冬蟲夏草中國被毛孢得到的菌絲，經(jīng)毒理、藥理、植化研究，證明與天然蟲草化學(xué)組成、藥理作用基本一致，可代替天然蟲草生產(chǎn)蟲草制品，以彌補(bǔ)自然資源的短缺，通過對發(fā)酵條件的優(yōu)化，菌絲體生物量和代謝產(chǎn)物的量均有明顯提高。

近年來，隨著天然產(chǎn)物化學(xué)和現(xiàn)代色譜技術(shù)的飛速發(fā)展，在對蟲草產(chǎn)品研發(fā)中已逐步由蟲草原料或粗提物的直接利用轉(zhuǎn)向更深層次的功能性代謝產(chǎn)物研究。國內(nèi)外已對蟲草代謝產(chǎn)物做了大量的研究，代謝產(chǎn)物主要包括核苷、多糖、多肽、甾醇等幾大類化合物，其中嘌呤類核苷、蟲草多糖、甘露醇等具有代表性的功能性代謝產(chǎn)物在生物合成、藥理作用等方面的研究初見成效。

核苷類是蟲草最主要的活性物質(zhì)之一，其中嘌呤類核苷包括腺苷和鳥苷及它們的前體類物質(zhì)次黃嘌呤核苷（肌苷）和黃嘌呤核苷等。研究表明腺苷可作為心臟病治療藥物，還可用于診斷冠心病，其類似物具有抗病毒活性和抗腫瘤作用；肌苷可用于心臟病、肝病、白血球減少癥、血小板減少癥、視神經(jīng)萎縮和中心性視網(wǎng)膜炎等疾病的治療，能預(yù)防及解除由血防藥物引起的對心臟或肝臟的副作用；鳥苷則可作為三氮唑核苷、無環(huán)鳥苷等許多抗病毒藥物的合成原料。