[發明專利]一種利用靜電紡絲技術固定化辣根過氧化物酶的方法無效
| 申請號： | 201210172444.4 | 申請日： | 2012-05-30 |
| 公開（公告）號： | CN102703415A | 公開（公告）日： | 2012-10-03 |
| 發明（設計）人： | 牛軍峰;徐江捷;代云容;任雨晴;張思遠;鄭夢源 | 申請（專利權）人： | 北京師范大學 |
| 主分類號： | C12N11/08 | 分類號： | C12N11/08;C12N11/04 |
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| 地址： | 100875 北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 靜電 紡絲 技術 固定 辣根過氧化物酶 方法 | ||
1.一種制備電紡纖維膜固定化辣根過氧化物酶的方法，其特征在于：包括如下步驟：
1)將分子量為10萬的聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)顆粒溶于二氯甲烷中，加入嵌段共聚物表面活性劑，均勻混合后攪拌2小時得到共聚物混合凝膠；
2)稱取0.6毫克辣根過氧化物酶溶于0.3毫升pH值為4的磷酸鹽緩沖溶液中，震蕩搖勻至全部溶解；
3)取步驟2)中所得辣根過氧化物酶溶液或者經過熒光素異硫氰酸酯標記的濃度為2毫克/毫升的辣根過氧化物酶溶液加入共聚物混合凝膠中，攪拌直至形成均質乳液；
4)將步驟3)中所得乳液引入到高壓靜電紡絲裝置中，調節各參數以獲得穩定連續的噴射；
5)在接收板的鋁箔上收集電紡纖維膜，4～5小時后待纖維膜厚度達到0.5～1毫米，停止紡絲，所得載酶纖維膜儲存在4℃下備用。
2.根據權利要求1中所述的方法，其特征在于：載酶電紡纖維膜的制備步驟1)中所述的表面活性劑為聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物F108，其分子式為PEO132-PPO50-PEO132，分子量為15500克/摩爾。
3.根據權利要求1中所述的方法，其特征在于：載酶電紡纖維膜的制備步驟1)中聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)的質量濃度為11±0.5％。
4.根據權利要求1中所述的方法，其特征在于：載酶電紡纖維膜的制備步驟1)中加入的聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物F108的用量為聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)重量的11±0.5％。
5.根據權利要求1中所述的方法，其特征在于：載酶電紡纖維膜的制備步驟3)中辣根過氧化物酶溶液與混合凝膠的體積比為2.5±0.1％。
6.一種固定化辣根過氧化物酶，其特征在于：是以聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)為載體材料，并通過如權利要求1-5中任一權利要求所述的制備方法將辣根過氧化物酶原位包埋固定在電紡纖維中而得到。
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