[發明專利]檢測SLC26A4基因c.665G＞T突變的試劑盒

無效

• 申請號: 201210171761.4
• 申請日: 2012-05-29
• 公開（公告）號: CN102851359A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 王秋菊
• 申請（專利權）人: 王秋菊;中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 黃韌敏

1.一種用于檢測與前庭導水管擴大疾病相關的位于SLC26A4基因外顯子6的c.665G>T突變的試劑盒，所述試劑盒包括：

從待測樣品中提取DNA的試劑；

用于擴增樣本DNA的PCR反應試劑；

對PCR擴增產物進行測序的試劑；

其中，所述擴增樣本DNA的PCR反應試劑包括PCR引物，所述PCR引物擴增的目標片段包含SLC26A4基因第665位堿基。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其中所述PCR引物為選自下述引物中的一對：

SLC26A4-6F-1:5’-GGTTTCTATCTCAGGCAAACAT-3’，

SLC26A4-6R-1:5’-ATTGTTTCTGGAATGAACAGTGACC-3’；

SLC26A4-6F-2:5’-AGGAAGGGGAGTGATAGGGT-3’，

SLC26A4-6R-2:5’-GCCCAGACTCAGAGAATGAAT-3’；

SLC26A4-6F-3:5’-CTACCAGTATTTTTGTGCTAT-3’,

SLC26A4-6R-3:5’-CAAAGTGCTGGGATTACAGG-3’;

SLC26A4-6F-4:5’-GGACCGAAAGCCACATAAAT-3’,

SLC26A4-6R-4:5’-ACCACCACACCCAGCAAAT-3’。

3.如權利要求1或2所述試劑盒，所述試劑盒用于檢測位于SLC26A4基因外顯子6的c.665G>T突變的方法，包括以下步驟：

1）采集待測個體的血液、體液或組織樣本，提取DNA；

2）以該DNA為模板，以PCR引物進行PCR反應，得到PCR反應產物；

其中，所述PCR引物擴增的目標片段包含SLC26A4基因第665位堿基；

3）將得到的PCR反應產物進行直接測序，并將測序結果與SLC26A4正?；虻男蛄羞M行比較，確定是否存在SLC26A4基因的c.665G>T突變位點。

4.如權利要求3所述試劑盒，所述方法還進一步包括下述步驟：

4）按照正常閱讀框架進行翻譯以確定c.665G>T突變使氨基酸序列于222位發生錯義改變，并使第222位編碼的氨基酸由甘氨酸變為纈氨酸（p.G222V），極性氨基酸變為了非極性氨基酸。

5.如權利要求1所述的試劑盒在用于檢測前庭導水管擴大疾病中的用途。