[發(fā)明專利]檢測(cè)PJVK基因c.437G>A突變的試劑盒

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210171751.0
• 申請(qǐng)日: 2012-05-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102732614A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-10-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王秋菊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 王秋菊;中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 北京律誠(chéng)同業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11006
• 代理人: 黃韌敏

1.一種用于檢測(cè)與感音神經(jīng)性聾及聽(tīng)神經(jīng)病/聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙相關(guān)的位于PJVK基因的c.437G>A突變的試劑盒，所述試劑盒包括：

從待測(cè)樣品中提取DNA的試劑；

用于擴(kuò)增樣本DNA的PCR反應(yīng)試劑；

對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序的試劑；

其中，所述擴(kuò)增樣本DNA的PCR反應(yīng)試劑包括PCR引物，所述PCR引物擴(kuò)增的目標(biāo)片段包含PJVK基因第437位堿基。

2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其中所述PCR引物為選自下述引物中的一對(duì)：

PJVK-4F-1:5’-CAAATAGAGTCCCCTTCAACAG-3’，

PJVK-4R-1:5’-CTCCAGTATGCACGTAATTTCA-3’；

PJVK-4F-2:5’-TGGCTCTACACACATTTGCT-3’，

PJVK-4R-2:5’-ACAAGCCTGACTAGAAATTCAA-3’；

PJVK-4F-3:5’-TACTTTGGCTCTACACACAT-3’，

PJVK-4R-3:5’-GCCTGACTAGAAATTCAATAC-3’；

PJVK-4F-4:5’-GCCTTGATTTACTATTAGGTG-3’，

PJVK-4R-4:5’-CTATACAACTGCAGCTCTTTC-3’。

3.如權(quán)利要求1或2所述試劑盒，所述試劑盒用于檢測(cè)位于PJVK基因的c.437G>A突變的方法，包括以下步驟：

1）采集待測(cè)個(gè)體的血液、體液或組織樣本，提取DNA；

2）以該DNA為模板，以PCR引物進(jìn)行PCR反應(yīng)，得到PCR反應(yīng)產(chǎn)物；

其中，所述PCR引物擴(kuò)增的目標(biāo)片段包含PJVK基因第437位堿基；

3）將得到的PCR反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行直接測(cè)序，并將測(cè)序結(jié)果與PJVK正常基因的序列進(jìn)行比較，確定是否存在PJVK基因的c.437G>A突變位點(diǎn)。

4.如權(quán)利要求3所述試劑盒，其中所述方法進(jìn)一步包括下述步驟：

4）按照正常閱讀框架進(jìn)行翻譯以確定c.437G>A突變使氨基酸序列自146位發(fā)生錯(cuò)義突變，使精氨酸變成組氨酸(p.R146H)。

5.如權(quán)利要求1所述的試劑盒在用于檢測(cè)感音神經(jīng)性聾及聽(tīng)神經(jīng)病/聽(tīng)神經(jīng)病譜系障礙中的用途。