[發(fā)明專利]一種檢測次氯酸根的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210171396.7
• 申請日: 2012-05-29
• 公開（公告）號: CN102818802A
• 公開（公告）日: 2012-12-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 顏敘秀;霍方俊;陰彩霞
• 申請（專利權(quán)）人: 山西大學(xué)
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 山西五維專利事務(wù)所(有限公司) 14105
• 代理人: 楊耀田

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及次氯酸根檢測技術(shù)，具體屬于一種快速、定量地檢測次氯酸根的方法。

背景技術(shù)

NaOCl被廣泛用于漂白劑和消毒劑，其濃度范圍為10^-5～10^-2mol/L。它的質(zhì)子化形式（次氯酸，HClO),是生物重要的活性氧物種(ROS)，在有機(jī)體和水處理中作為抗菌劑。然而，過量的HClO能造成組織損傷和疾病，如：肝缺血再灌注損傷，動脈粥樣硬化，肺損傷，類風(fēng)濕和心血管疾病，神經(jīng)元變性，關(guān)節(jié)炎和癌癥。

目前已報(bào)道的檢測次氯酸根的方法有：比色法（S.M.Chen,J.X.Lu,C.D.Sun,H.M.Ma.Analyst?135(2010)577–582）、發(fā)光法（J.Ballesta-Claver,M.C.Valencia-Miron,L.F.Capitán-Vallvey.Anal.Chim.Acta.522(2004)267–273）、電化學(xué)法（A.P.Soldatkin,D.V.Gorchkov，C.Martelet,N.Jaffrezic-Renault.Sens.Actuators,B.43(1997)99–104）、色譜法（A.Gallina,P.Pastore,F.Magno.Analyst?124(1999)1439–1442.），這些方法有的靈敏度低、有的耗時繁瑣。也有一些基于次氯酸強(qiáng)的氧化特性的檢測方法（Y.K.Yang,H.J.Cho,J.Lee,.Shin,J.Tae.Org.Lett.11(2009)859-861）。然而，這些方法由于試劑結(jié)構(gòu)相對復(fù)雜而不容易合成。所以，發(fā)展一種檢測過程簡單、靈敏、成本低、適合實(shí)際使用的方法非常必要。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)次氯酸根檢測中存在的問題，提供一種體系簡單、操作方便、選擇性高、靈敏度高的次氯酸根定量檢測方法。

本發(fā)明提供的一種檢測次氯酸根的方法，是在pH為7.0的HEPES緩沖溶液中，基于二吡啶甲醛熒光素酰腙（2-pyridylaldehyde?fluorescein?hydrazone，F(xiàn)HP），利用次氯酸根能將Cu⁺氧化為Cu²⁺，Cu²⁺與FHP形成配合物后，在紫外可見光譜上發(fā)生變化，實(shí)現(xiàn)次氯酸根的定量檢測。

所述的FHP結(jié)構(gòu)式為：

FHP的合成路線：

FHP的合成方法，步驟為：將熒光素酰肼、2-吡啶甲醛按摩爾比1∶1混合，完全溶解在甲醇中，用滴加1摩爾量當(dāng)量的無水乙酸，回流2小時，用體積比為1∶1的甲醇和石油醚重結(jié)晶得到黃色的目標(biāo)產(chǎn)物。

本發(fā)明提供的一種檢測ClO^-的方法，包括如下步驟：

（1）、配制溶液：配制pH=7、濃度為10mM的HEPES緩沖溶液，配制2mM的二吡啶甲醛熒光素酰腙（FHP）乙醇溶液,配制2mM的Cu⁺(加入抗壞血酸鈉做穩(wěn)定劑)乙腈溶液；

（2）、制定標(biāo)準(zhǔn)曲線：用蒸餾水配制2mM的ClO^-溶液；將2mL的HEPES緩沖溶液和40μL的FHP乙醇溶液以及80uL的Cu⁺乙腈溶液加到同一比色皿中；然后逐漸加入ClO^-溶液，在加入ClO^-溶液的體積依次為0、20、40、60、80、100uL時，在紫外可見分光光度儀上測定502nm對應(yīng)的吸收強(qiáng)度A為0、0.13、0.25、0.37、0.47、0.58；最后以c=ClO^-濃度/10^-5mol/L為橫坐標(biāo)，吸收強(qiáng)度A為縱坐標(biāo)繪制得到ClO^-濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線；線性回歸方程為：A=0.01143+0.05771c；

（3）、檢測：將2ml的HEPES緩沖溶液、40μL的FHP乙醇溶液和80μL的Cu⁺乙腈溶液，加入到另一個紫外比色皿中，從待測樣品V_總uL中，用微量進(jìn)樣器取V₁uL加到此比色皿中，在紫外可見分光光度儀上檢測在502nm處的吸收強(qiáng)度A；

（4）、計(jì)算：將測得的吸收強(qiáng)度A代入上述線性回歸方程，即可求得比色皿中ClO^-的濃度c×10^-5mol/L，樣品中ClO^-的濃度為c×10^-5×V_總/V₁。