[發明專利]具有基因藥物程序性釋放性能的金納米球殼載體及制備方法

有效

• 申請號: 201210168123.7
• 申請日: 2012-05-25
• 公開（公告）號: CN102805870A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 高立章;劉貴高;原續波;何芳
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61K47/02;A61K48/00;A61K41/00;A61P35/00;A61K31/704
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 王麗

1.制備具有基因藥物時序性釋放性能的金納米球殼結構載體，其特征是金納米球殼內部空腔結構載藥，藥物通過脈沖激光激發釋放，球殼外面接陽離子聚合物來負載帶負電的基因，在細胞中自行釋放。

2.如權利要求1所述載體，其特征是用來負載基因的陽離子聚合物是聚組氨酸，分子量大于5000。

3.如權利要求1所述載體，其特征是用來負載的基因為20-100個堿基的RNA。

4.構建權利要求1的具有基因藥物時序性釋放性能的金納米球殼結構的方法，其特征是步驟如下：

a.將總物質的量為0.5-1.5umol的二肉豆蔻酰磷脂酸和二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿按照1:1的比例溶解在1mL氯仿和甲醇的混合溶液中，在脂質體形成過程中加入親水性的藥物鹽酸阿霉素，使得鹽酸阿霉素的濃度為30nM，加入1-1.5mg的陽離子聚合物聚組氨酸或者聚賴氨酸，加入10-15uL質量分數為1%的氯金酸溶液和20-30uL濃度為20mM的鹽酸羥胺，形成載藥的金納米球殼結構；

b.用1mmol的Traut’s試劑與1-2mg聚組氨酸反應，修飾出巰基，利用巰基與金的反應，將反應后的聚組氨酸加入0.5-1.5mL的金納米球殼溶液中，聚組氨酸的側基咪唑基帶正電，而基因帶負電，因此分別將2倍，8倍，16倍，32倍，64倍載藥的金納米球殼溶液與等量as-micro-RNA-21或者Danio?rerio?microRNA?146b-1溶液混合時，可以得到復合物。

5.如權利要求4所述的方法，其特征是所述的步驟a為：

在600mL濃度為0.2mM硝酸銀溶液中加入0.6-1mL濃度為1.0M硼氫化鈉和0.5mM檸檬酸鈉水溶液，將溶液攪拌均勻，再往溶液里加入0.6-1mL的2.0M鹽酸羥胺和1.5mL的0.1M的硝酸銀溶液，攪拌過夜，形成比較大的銀顆粒。快速將3.8-5mL濃度為25mM的氯金酸溶液和銀納米粒子混合，得到金納米球孔洞結構，將溶液避光保存一星期。將上述得到的溶液用20000分子量的透析卡在1500mL的500uM的檸檬酸鈉緩沖溶液（pH=5.5）中透析提純，得到金納米球孔洞結構的溶液。然后加入鹽酸阿霉素，使得溶液中鹽酸阿霉素濃度為40-60nM，加入三乙胺，使得溶液中三乙胺的濃度為40-60nM，形成載藥的金納米孔洞結構。?