[發明專利]一種縮短煙葉發酵周期的微生物制劑及其應用

有效

• 申請號: 201210167608.4
• 申請日: 2012-05-28
• 公開（公告）號: CN102660461A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 吳艷;汪長國;李寧;寇明鈺;戴亞;曾代龍;賈玉紅
• 申請（專利權）人: 川渝中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/00
• 分類號: C12N1/00;C12N1/20;A24B15/20;C12R1/07;C12R1/085
• 代理公司: 成都信博專利代理有限責任公司 51200
• 代理人: 卓仲陽

1.一種縮短煙葉發酵周期的微生物制劑，其特征在于，主要由蠟狀芽孢桿菌Bacillus?cereus與解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliqyefaciens構成，其活菌數比例為10～200:1～50；該微生物制劑所包含的微生物均分離自煙葉表面，經中國普通微生物保藏管理中心鑒定，分別屬于蠟狀芽孢桿菌Bacillus?cereus，保藏號為CGMCC?No.3864和解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliqyefaciens,保藏號為CGMCC?No.3866。

2.根據權利要求1所述的一種縮短煙葉發酵周期的微生物制劑，特征在于，所述的蠟狀芽孢桿菌Bacillus?cereus與解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliqyefaciens是通過如下方法制備：將剪碎的煙葉表面加入已滅菌的LB培養液中，于37℃搖床培養24小時后，用無菌吸管吸取培養液，采用稀釋涂布法在滅菌固體LB培養基上進行平板涂布，待菌長出后，用接種針在另一滅菌固體LB培養基上進行劃線法分離，經純化培養后得該單菌落純培養菌。

3.根據權利要求2所述的一種縮短煙葉發酵周期的微生物制劑的制備，其特征在于，將上述單菌落純培養菌經過試管培養基、擴大培養基、液體發酵培養基培養后，分別獲得蠟狀芽孢桿菌和解淀粉芽孢桿菌菌液。

4.根據權利要求3所述的一種縮短煙葉發酵周期的微生物制劑的制備，其特征在于，將上述蠟狀芽孢桿菌和解淀粉芽孢桿菌菌液分別直接離心后得到菌泥，按照活菌數比例10～200:1～50進行混合，按重量百分比加入海藻糖1～2%、甘油1～2.8%、谷氨酸鈉0.5～1.5%作為該菌泥的復合凍干保護劑進行冷凍干燥得到粉末狀微生物制劑。

5.根據權利要求4所述的一種縮短煙葉發酵周期的微生物制劑的應用，其特征在于，將上述粉末狀微生物制劑按照0.5～5%的比例溶于無菌水中，制成微生物制水劑，將該水劑以3～10%的比例均勻噴施到煙葉上，將煙葉于25℃～50℃，65%?RH～80%?RH下人工發酵10～40天，可獲得與自然醇化煙葉品質無明顯差異的人工發酵后煙葉。

6.根據權利要求4所述的一種縮短煙葉發酵周期的微生物制劑的應用，其特征在于，將該微生物制劑用于煙葉發酵過程，具有改善煙葉品質、縮短煙葉發酵周期的作用。