[發明專利]一種I型人類免疫缺陷病毒（HIV-1）新發感染酶免檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201210166939.6
• 申請日: 2012-05-25
• 公開（公告）號: CN102680681A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 戈軍;葉藝;張誌;曹健榮
• 申請（專利權）人: 北京金豪制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所 11130
• 代理人: 王為

1.一種I型人類免疫缺陷病毒（HIV-1）新發感染酶免檢測試劑盒，其特征在于，包括以下組分：HIV-1gp41蛋白；空白酶聯板；酸性洗脫液；辣根過氧化物酶標記的羊抗人IgG；TMB顯色液；終止液。

2.根據權利要求1的試劑盒，其特征在于，其中，HIV-1gp41蛋白為gp41重組蛋白；空白酶聯板為NUNC空白酶聯板；酸性洗脫液為：0.01M檸檬酸鹽緩沖液（pH=3.0），酶結合物為含有羊抗人IgG的酶結合物稀釋液，其中所述酶結合物稀釋液為0.05M的PBS緩沖液（pH=7.2），其中含有1%的牛血清白蛋白，1%蔗糖，0.1%的吐溫-20和0.1%的Triton-100；TMB顯色液為四甲基聯苯胺溶液；終止液為1N的硫酸溶液。

3.根據權利要求1的試劑盒，其特征在于，是將各組分進行配制，配制成適合應用的分開包裝的單元，本發明的包含的單元如下：

??①??包被酶聯板??②??20×洗滌緩沖液??③??樣品稀釋液??④??酸性洗脫液??⑤??酶結合物??⑥??顯色液??⑦??終止液??⑧??強陽性對照（HPC）??⑨??弱陽性對照（LPC）??⑦??校準品（CAL）??⑧??陰性對照（NC）

4.根據權利要求3的試劑盒，其特征在于，其中包被酶聯板的制備方法如下：

1)制備工藝

2)包被：使用0.05M的pH為6.0的磷酸鹽緩沖液將HIV-1gp41蛋白稀釋到0.063μg/mL，然后將稀釋后的緩沖液加入到96T的微孔板中，每孔加入100μL，然后將微孔板置于4°C包被18～22h；

3)洗板：使用自動化洗板機洗板2次，抽干；

4)封閉：每孔加入200μL封閉液，然后將微孔板置于4°C封閉18～22h；

5)干燥：使用自動化洗板機將微孔板抽干，干燥過夜，干燥條件為溫度18～25°C，濕度<30%；

6)裝袋：將包被好的酶聯板放入鋁箔袋中，放入一個干燥劑后封裝，置于4°C條件下保存；

包被過程中使用的各種液體的配方如下：

1.）包被液配方：0.05M的PBS緩沖液（pH=6.0）；

2.）封閉液配方：0.05M的PBS緩沖液（pH=6.0），其中含有0.5%的酪蛋白，2%的蔗糖，1%的甘氨酸，0.1%的Proclin-300；

3.）洗液配方：0.05M的PBS緩沖液（pH=7.2），其中含有0.05%的吐溫-20；所有液體配制均采用純水。