[發明專利]一種用于快速檢測腸道病毒71型IgM的膠體金試紙條

無效

• 申請號: 201210164454.3
• 申請日: 2012-05-24
• 公開（公告）號: CN102680694A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 張瑩;倪紅霞;孫茜
• 申請（專利權）人: 藍十字生物藥業（北京）有限公司;寧波市疾病預防控制中心
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 張濤

技術領域，

本發明屬于生物檢測領域，涉及一種醫用檢測耗材，具體涉及一種用于快速檢測腸道病毒71型IgM的膠體金試紙條。

背景技術

腸道病毒71型IgM屬于腸道病毒屬A型，腸道病毒一般是以數字命名的，排列順序代表著其發現的先后次序。按順序，這種病毒被命名為腸道病毒71型（Human?enterovirus?71），簡稱EV71，是引起嬰幼兒手足口病（hand-foot?and?mouth?disease；HFMD）主要病原體之一。人類腸病毒71型于1969年首次從加利福尼亞患有中樞神經系統疾病的嬰兒糞便標本中分離出來的。

EV71主要引起手足口病，還可引起無菌性腦膜炎、腦干腦炎和脊髓灰質炎樣的麻痹等多種神經系統疾病。手足口病和中樞神經系統感染是EV71感染而引起的兩大常見臨床癥狀。病毒從咽部或腸道侵入，在局部黏膜或淋巴組織中繁殖，并由局部排出，此時可引起局部癥狀。繼而病毒又侵入局部淋巴結，并由此進入血液循環導致第一次病毒血癥。病毒經血循環侵入網狀內皮組織、深層淋巴結、肝、脾、骨髓等處大量繁殖并由此進入血液循環，引起第二次病毒血癥。病毒可隨血流進入全身各器官，如中樞神經系統、皮膚黏膜、心臟等處，進一步繁殖并引起病變。易感者感染EV71后，出現血管變態反應和組織炎癥病變。當病毒累及中樞神經系統時，組織炎癥較神經毒性作用更加強烈，中樞神經系統小血管內皮最易受到損害。細胞融合、血管炎性變、血栓形成可導致缺血和梗死。在脊髓索、腦干、間腦、大腦和小腦的局部組織中，除嗜神經性作用外，還存在廣泛的血管周圍和實質細胞炎癥。腸道病毒71型IgM危害極大，目前急需簡便快捷準確的儀器是實現對其的檢測。

免疫膠體金技術(Immunogold?labelling?techique)是上世紀80年代繼熒光素、放射性同位素和酶三大標記技術后發展起來的固相標記免疫測定技術。該技術主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性，當這些標記物在相應的配體處大量聚集時，形成肉眼可見的紅色或粉紅色斑點，因而用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中?？焖僭\斷試紙條是20世紀90年代以來在單克隆抗體技術、膠體金免疫層析技術和新型層析材料基礎上發展起來的一項新型體外診斷技術，近年來發展迅速，在生物醫學領域特別是醫學檢驗中得到了廣泛應用。該技術主要是將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在硝酸纖維膜上，膠體金標記試劑吸附在結合墊上，當待測樣品加到試紙條一端的樣品墊上后，通過毛細作用向前移動，溶解結合墊上的膠體金標記試劑后相互反應，再移動至固定的抗原或抗體區域時，待測物金標試劑復合物與之發生特異性結合而被截留，膠體金標記聚集在檢測帶上，可通過目測得到直觀的顯色結果。而游離的標記物則越過檢測帶，從而達到與檢測物自動分離的目的。

抗體捕獲法（亦稱反向間接法）ELISA，主要用于血清中某種抗體亞型成分的測定。其原理是將抗原固化在基質上，加入含抗體的雜交瘤培養上清，洗去未結合的抗體，結合于抗原上的抗體可由標記有熒光素、放射性核素或一些酶的兔抗小鼠免疫球蛋白抗體識別。

市場上檢測腸道病毒71型（IgM）多采用酶聯免疫檢測試劑盒，但試劑盒檢測雖然檢出限較低（0.15mg/L），但是檢測時間長，不適合現場測定，申請號為201010171862.2的發明專利申請，提出一種腸道病毒71型抗體（IgM）診斷試劑盒（酶聯免疫法），該試劑盒檢測檢測腸道病毒71型抗體（IgM）前、后都需要做必要的儀器清洗及保養工作，檢測時間長，并且要求本領域專業技術人員來操作。

目前，將抗體捕獲法和免疫膠體金技術相結合，同間保證檢測的靈敏度和特異性，并且使用方便，操作簡單，準確快速，用于檢測腸道病毒71型IgM的膠體金試紙條鮮有報道。

發明內容

為解決上述領域的需求和空白，本發明旨在提供一種用于快速檢測腸道病毒71型IgM的膠體金試紙條，本發明試紙條采用抗體捕獲法和免疫膠體金技術相結合快速檢測人血清、血漿或全血中的腸道病毒71型IgM，用于手足口疾病患者的檢測；本發明試紙條操作簡單，拿來即用，不需要本領域的專業人員，能夠滿足不同層次人員的需要，容易普及到基層社區醫院以符號顯示結果，擺脫了對設備、儀器、人員及貯存和運輸環境的特殊要求，并且具有快速、簡便、靈敏、準確、特異的特點。

一種用于快速檢測腸道病毒71型IgM的膠體金試紙條，在高度方向上包括基板支撐層、反應試劑載體吸附層，所述反應試劑載體吸附層固定在所述基板支撐層上；

所述反應試劑載體吸附層從沾液端到手持端依次設有樣品纖維墊，金標纖維墊，纖維素藥膜，手持端吸水材料墊；