[發明專利]用于診斷白血病的試劑盒和系統

有效

• 申請號: 201210164310.8
• 申請日: 2012-05-24
• 公開（公告）號: CN102706842A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 唐亞林;楊千帆;孫紅霞;尚倩;姜薇;蓋偉;向俊鋒
• 申請（專利權）人: 中國科學院化學研究所
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/31
• 代理公司: 北京弘權知識產權代理事務所(普通合伙) 11363
• 代理人: 王磊;許偉群

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體而言涉及一種用于診斷白血病的試劑盒。

背景技術

白血病是造血系統的惡性腫瘤，又叫“血癌”，在兒科惡性腫瘤的發病率中居第一位，它的死亡率在導致兒童及35歲以下成年人死亡的惡性腫瘤中排首位，是威脅兒童和青壯年生命健康最常見的惡性腫瘤。目前我國白血病的發病率，在各種腫瘤發病率中位居6-8位。

白血病的病源是由于細胞內DNA的變異形成的骨髓中造血組織的不正常工作。骨髓中的干細胞每天可以制造約540萬個/1立方毫米的紅血球和7400個/1立方毫米白血球，而白血病病人過分生產白血球且多數的白細胞是不成熟的，為幼稚細胞，其存活期比正常情況下長。盡管這種白細胞數量很大，然而卻不能像正常白細胞那樣抗感染。體內這種白細胞的增多，會直接影響一些重要器官的功能，影響正常健康血細胞的產量。由于腫瘤細胞惡性增生，抑制紅細胞和血小板止血的產生，甚至沒有足夠的正常白細胞抗感染，很容易受擦傷、出血、感染。而且過多的白細胞也妨害骨髓的其他工作，這使得骨髓生產其它血細胞的功能降低。

白血病可以擴散到淋巴結、脾、肝、中樞神經系統和其它器官，產生不同癥狀。這些癥狀，主要跟骨髓內造血功能的破壞有關，如持續發燒，感染經久不愈，貧血，點狀出血等；還有血癌細胞穿滲組織引起的癥狀，如淋巴結腫大，骨痛或關節痛，牙齦腫脹，肝脾腫大等。

白血病的診斷非常困難，一般需要結合臨床表現、體格檢查和實驗室化驗三方面綜合判斷才能最終確診。白細胞計數可以在一定程度上反映骨髓造血功能異常的風險，但單單此項檢查遠遠不能達到確診的需要。通常而言，要確診白血病，外周血檢和骨髓穿刺取樣檢測都是必須的。

但是，由于骨髓穿刺并不易為常人所接受，因此目前臨床無法提供一種白血病風險預警的手段，同時也大大阻礙了白血病的早期發現及介入治療。當病人察覺到時，往往已經進入了白血病發病的中后期。此外，血液中癌細胞的微小殘留是預后的一個重要指標，對于微小殘留病的準確檢測，對指導醫生的下一步治療有重要意義。然而目前臨床常用的分子生物學檢測方法(PCR)所能達到的靈敏度僅為每10⁴個血細胞含有一個癌細胞，限制了對微小殘留病的檢測水平。

菁染料是一種常用染料，具有獨特的光敏感性質，幾個世紀以來，伴隨其獨特理化、光學性質被發現，逐漸被用做顯影劑，光敏劑，非線性光學材料等。

發明內容

本發明的一個方面提供一種用于診斷白血病的試劑盒。

根據本發明的試劑盒包括試劑I和試劑II，其中試劑I為pH值為6～8的緩沖液，試劑II為菁染料，所述菁染料具體為下式I所示的化合物

式I

其中：R₁為C₁-C₆的烷基、苯基、烷基取代的苯基；R₂、R₃、R₄和R₅獨立地選自H或C₁-C₆的烷基，或者R₂和R₃與它們所連接的碳原子一起形成5元至7元的環結構，或者R₄和R₅與它們所連接的碳原子一起形成5元至7元的環結構；R₆和R₇獨立地選自C₁-C₆的烷基；Y為鹵素；X₁，X₂獨立選自碳(C)、氧(O)、硫(S)、硒(Se)、碲(Te)。

根據本發明的試劑盒，其還包括試劑III，所述試劑III為極性大于正丙醇的有機溶劑，即極性大于4.0的有機溶劑，此類溶劑的非限定性實例包括：甲基異丁酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、異丙醇、氯仿、甲基乙基酮、二惡烷、吡啶、丙酮、硝基甲烷、乙腈、二甲基甲酰胺、甲醇、乙二醇、二甲亞砜或它們的混合物。

根據本發明的試劑盒，其中對于式I的化合物而言，其制備方法可以參考Leslie?G.S.，Brooker?and?Frank?L.W.，JACS，1935，547-551中記載的合成路線，也可以使用本領域熟知的其他方法來制備。

根據本發明的試劑盒，其中試劑I優選為pH6～8的含有一價金屬離子的緩沖液，包括但不限于磷酸鈉-磷酸氫鈉緩沖液、磷酸鉀-磷酸氫鉀緩沖液、巴比妥鈉-鹽酸緩沖液或檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。