[發明專利]多肽類提取物的特征圖譜測定方法

無效

• 申請號: 201210164006.3
• 申請日: 2012-05-24
• 公開（公告）號: CN102680602A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 尹桂香
• 申請（專利權）人: 尹桂香
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 哈爾濱東方專利事務所 23118
• 代理人: 陳曉光

技術領域：

本發明涉及一種多肽類提取物的質量控制方法，具體涉及一種多肽類提取物的特征圖譜測定方法。

背景技術：

多組分生化藥的主要成分包括多肽，氨基酸，核酸等物質，這些物質在紫外光區，在一定的色譜條件下，其中各個色譜峰的相對保留時間等參數具有一定的特征性。同時，目前對于多組分生化藥的質量分析和控制的手段還很落后，質量標準還不完善，對于它的鑒別還多采用茚三酮顯色反應，茚三酮反應是指在加熱條件下，氨基酸或多肽與茚三酮反應生成紫色化合物的反應，此反應雖然具有靈敏度高的優點，但在應用時卻不能夠區分不同來源的肽，無法準確反映現有多組分生化藥的質量狀況。為此，我們將特征圖譜方法應用到多組分生化藥的鑒別中，從而更全面有效地對此類產品進行質量控制。

發明內容：

本發明的目的是提供一種多肽類提取物的特征圖譜測定方法，該方法中供試品特征圖譜與標準特征圖譜相似度經計算大于0.8，本方法能夠區分不同來源的多肽，對于提高此類產品的質量標準，保證藥品質量，保障患者用藥安全都有重要的意義。

上述的目的通過以下的技術方案實現：

一種多肽類提取物的特征圖譜測定方法，該方法包括如下步驟：

（1）取不少于3批的多肽類提取物，加水配成1ml含有多肽類提取物5mg濃度，精密吸取1μl注入液相色譜儀，按照指定色譜條件進行試驗，將生成的圖譜導入中藥色譜特征圖譜相似度評價系統，得到標準特征圖譜；

（2）取對照品和供試品加水配成適宜濃度的溶液，各精密吸取1μl，分別注入液相色譜儀，按所述的指定色譜條件測定，記錄得供試品特征圖譜；

（3）通過將供試品特征圖譜和標準特征圖譜進行相似度比較進行測定。

所述的多肽類提取物的特征圖譜測定方法，所述的指定色譜條件為：高效液相色譜法測定，色譜柱選擇C8，C18，ACQUITYULC?HSS?T3或同類型BEH柱，流動相A：1‰~1%三氟乙酸水溶液，流動相B：水、乙腈或甲醇、三氟乙酸或甲酸的比例為：400~100：100~400：0~1梯度洗脫，檢測波長為210~390nm，柱溫20~55℃，理論塔板數按對照品峰計算應不低于5000。

所述的多肽類提取物的特征圖譜測定方法，所述的梯度洗脫為：0到4.5分鐘流動相A體積比為98%，流動相B的體積比為2%；4.5到7.5分鐘流動相A體積比由98%線性下降到70%，流動相B體積比由2%線性上升到30%；7.5到8分鐘流動相A體積比由70%線性上升到98%，流動相B體積比由30%線性下降到2%；8到10分鐘維持上述比例進行洗脫，總洗脫時間為10分鐘；流速為0.2~0.7ml/min。

所述的多肽類提取物的特征圖譜測定方法，供試品特征圖譜與標準特征圖譜相似度大于0.8。

有益效果：

本發明能夠對不同來源的多肽，尤其是從動物骨骼，內臟，腺體提取的動物源性多肽進行區分，依據此方法可以進一步提高多組分生化藥的質量標準，對多組分生化藥的質量起到一定的控制作用。

附圖說明：

附圖1是標準特征圖譜。

其中參數設置為：積分參數：峰寬4.90?閾值?4.80?積分時間1.0~5.0

相似度計算參數：自動匹配時間漂移1.0

具體實施方式：

實施例1：

一種多肽類提取物的特征圖譜測定方法，該方法包括如下步驟：

（1）取不少于3批的多肽類提取物，加水配成適宜濃度，精密吸取1μl注入液相色譜儀，按照一定色譜條件進行試驗，將生成的圖譜導入中藥色譜特征圖譜相似度評價系統，得到標準特征圖譜；

（2）取對照品和供試品加水配成適宜濃度的溶液，各精密吸取1μl，分別注入液相色譜儀，按一定的色譜條件測定，記錄得供試品特征圖譜；

（3）將供試品特征圖譜和標準特征圖譜進行相似度比較。