[發明專利]一種用于生物化學發光檢測的微流控芯片及其檢測方法

無效

• 申請號: 201210163573.7
• 申請日: 2012-05-24
• 公開（公告）號: CN102788781A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發明（設計）人: 張武明;李振煜;王酉;葉杭慶;李光
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;B01L3/00
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

1.一種用于生物化學發光檢測的微流控芯片，其特征在于：所述的芯片包括由上到下依次設置的接口層（1）、透光層（2）、溝道層（3）、反光層（4）和固定層（5），所述的各層之間通過粘合劑上下連接并通過緊固件（6）固定，所述的接口層（1）、透光層（2）上分別設有進液孔（11）和出液孔（12），接口層（1）上還設有光纖接孔（13），所述的溝道層（3）上設有依次連通的進液流動通道（31）、微混合器（32）、檢測池（33）、廢液緩沖池（34），所述的進液流動通道（31）與進液孔（11）連通，廢液緩沖池（34）與出液孔（12）連通，所述的光纖接孔（13）設置在檢測池（33）的上方，光纖接孔（13）的底部與透光層（2）連接，檢測池（33）的上部與透光層（2）的下表面相接，檢測池（33）的底部與反光層（4）連接，所述的廢液緩沖池（34）的底部與固定層（5）連接。

2.根據權利要求1所述的一種用于生物化學發光檢測的微流控芯片，其特征在于：所述的接口層（1）上設有若干個進液孔（11），所述的進液孔（11）的孔徑為0.8mm～2.2mm，接口層（1）上設置的出液孔（12）的孔徑為1.2mm～2.8mm，所述的光纖接孔（13）的孔徑為1?mm～5.5mm。

3.根據權利要求1或2所述的一種用于生物化學發光檢測的微流控芯片，其特征在于：溝道層（3）上設有與接口層（1）上進液孔（11）數目一致的進液流動通道（31），每個進液流動通道（31）分別與微混合器（32）連通，所述的進液流動通道（31）的寬度為1.2mm～2.8mm，深度為1.2mm～2.2mm。

4.根據權利要求1所述的一種用于生物化學發光檢測的微流控芯片，其特征在于：所述的微混合器（32）呈折線形溝道、方形內設交叉線形溝道或矩形內設并排溝道形結構，微混合器（32）溝道的寬度和深度分別為0.45mm～1.05mm。

5.根據權利要求1所述的一種用于生物化學發光檢測的微流控芯片，其特征在于：所述的檢測池（33）呈圓孔形，檢測池（33）的孔徑(d)與溝道層厚度(h)、光纖芯徑(?)及數值孔徑(α)滿足：???????????????????????????????????????????????，所述的檢測池（33）的容積小于廢液緩沖池（34）的容積。

6.根據權利要求1或2或4或5所述的一種用于生物化學發光檢測的微流控芯片，其特征在于：接口層（1）的厚度為3.4mm～4.6mm，透光層（2）的厚度為0.25mm～0.45mm，溝道層（3）的厚度為2.4mm～3.6mm，反光層（4）的厚度為0.7mm～1.6mm，固定層（5）的厚度為1.8mm～4.2mm。

7.一種用權利要求1所述的用于生物化學發光檢測的微流控芯片的檢測方法，其特征在于：所述的檢測方法為以下步驟，?

1）將用于生物化學發光檢測的微流控芯片接口層（1）上的進液孔（11）通過進液流路管與蠕動泵連接，出液孔（12）與出液流路管連接，檢測光纖一端插入光纖接孔（13），另一端連接至光子計數器，將光子計數器連接至計算機上；蠕動泵的數目與進液孔的數目一致；

2）洗清流路，依次用0.1～1mol/L的堿溶液，?0.1～1mol/L酸溶液，?0.1～1mol/L的堿溶液，以1uL/s～10uL/s的流速沖洗微流控芯片的液體流路通道和溶液池，再用超純水，以1uL/s～10uL/s的流速沖洗微流控芯片的液體流路通道和溶液池；

3）以0.1uL/s～3uL/s的流速向進液流動通道（11）內分別通入15uL～100uL熒光素酶發光檢測液和15uL～100uL?含ATP的待測樣品液，即可測得生物發光反應的光子計數響應曲線。

8.根據權利要求7所述的一種用于生物化學發光檢測的微流控芯片的檢測方法，其特征在于：步驟1）中進液孔（11）與進液流路管、出液孔（12）與出液流路管、檢測光纖與光纖接孔（13）分別使用粘合劑固化，粘合劑選自乙烯-醋酸乙烯熱熔膠。