[發明專利]蜂膠抗粉塵螨過敏活性物質的分離方法

有效

• 申請號: 201210162441.2
• 申請日: 2012-05-23
• 公開（公告）號: CN102784170A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發明（設計）人: 王沫;陶文琦;安龍濬
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: A61K35/64
• 分類號: A61K35/64;A61P33/14
• 代理公司: 北京市京大律師事務所 11321
• 代理人: 黃啟行;方曉明

技術領域

本發明涉及蜂膠的深度利用，更具體地說，本發明涉及蜂膠活性物質的提取方法以及蜂膠活性物質在抑制粉塵螨過敏原中的應用領域。

背景技術

蜂膠英文Propolis來源于古代希臘語，是由pro（在前方）和“lis”（城堡）組成，含義是蜂膠有縮小蜂巢入口的作用(Castaldo?and?Capasso?2002)。蜂膠一般是由工蜂采集植物的嫩芽、嫩枝，再混以樹膠、花粉、蜂蜜等物質送至蜂巢，經由內勤蜂的舌腺、蠟腺等腺體加工轉化而形成的不透明膠體狀物質，多呈棕褐色、灰褐色、黃褐色、灰綠色、暗綠色，極少數呈深黑色(Rak1996)。由于蜂巢內部空間狹小、潮濕的特性使其有利于微生物的生存，內勤蜂便將蜂膠涂抹于蜂巢縫隙或其他需要的地方，以阻止外部細菌的進入、風干入侵者尸體，保證蜂巢內部環境的整潔，有利于蜂王漿、花粉等蜂產品的保存。

蜂膠作為一種匯集了動植物的多種產物和次級代謝產物而存在的天然物質，成分極為復雜（見下表1-1）。現階段已經分離鑒定出的蜂膠成分達三百多種，其中黃酮類物質71種，氨基酸25種，芳香族酸、酯類59種，以及多種酯、醛、醇類化合物，還有多種維生素和鐵、鋅、鎘等微量元素。化學成分的多樣性賦予了蜂膠豐富的生物學活性，目前蜂膠已經被證實的生物學活性主要有抗腫瘤、抗氧化、抗菌消炎、護肝等生物學活性，還有資料顯示蜂膠制劑對呼吸道疾病、皮膚疾病、心血管疾病等方面的疾病有顯著療效。

蜂膠資源稀少，一個五六萬只得蜂群蜂膠的年產量僅為100多克，因此國外市場稱蜂膠為“紫色黃金”。據調查1支濃度為25%、凈含量為30g的蜂膠口服液在美國市場上的零售價為30美元左右，1支普通的蜂膠口服液（15ml,20g）的售價也在20美元以上，尤其是巴西蜂膠在世界上享譽盛名，其相關商品售價遠遠高于其他產地蜂膠產品，也已經分離出多種具有生物活性的化學成分。

表1-1蜂膠的主要成分列表

中國蜂膠研發起步較晚，早期主要以原材料的形式出口，加工利用率和附加值均較低。但是中國蜂膠相對于外國蜂膠而言具有儲量大、分布范圍廣等資源優勢。自2005年起蜂膠被列入《藥典》后，蜂膠被廣泛應用于在醫療衛生、食品貯藏加工、日用品加工和中醫藥等方方面面。加大中國蜂膠的活性成分研究，開發具有實際應用價值的蜂膠產品將會為中國蜂膠的產業化和標準化提供更好的理論依據。

隨著現代分析技術的發展，關于蜂膠活性成分的提取、分離與鑒定成為研究的熱點。從九十年代至今國內外對中國蜂膠樣品的研究報道萬余篇，現階段也已經明確中國蜂膠化學組分和生物學活性具有豐富的多樣性。

但是，如上所述，蜂膠的成分復雜，要從中提取出有活性的物質非常困難，本發明人長期致力于蜂膠的深度開發利用，并在長期研究的基礎上建立了一套的從蜂膠中提取活性物質的方法體系。而且，在建立優化該方法體系的過程中，意外地發現所提取得到的物質能夠有效地抑制粉塵螨過敏原的活性。

眾所周知，粉塵螨是一類主要存在于室內塵土中的螨類，在世界范圍內有60余種，僅中國就有34種。世界范圍內統計結果證明居室內最優勢的粉塵螨類是Dermatophagoides?farinae品系。由于粉塵螨普遍存在于人類居住環境的灰塵中,可引起人體許多過敏反應如過敏性哮喘、過敏性鼻炎、過敏性皮膚疾患等。因此，粉塵螨越來越得到人們的重視。

粉塵螨過敏原的組成非常復雜，種類繁多。目前國際免疫聯合會(1UIS)已經把粉塵螨過敏原進行了歸納和分類，共有14種之多。

粉塵螨屬于吸入性過敏原中最重要的一種，當灰塵被揚起時粉塵螨的蟲體、尸體、糞便、卵及脫落下的皮殼等過敏原，隨之進入人的呼吸系統，進而引發呼吸系統的過敏性疾病。

從粉塵螨過敏原的免疫學參數比較可知，90%以上的粉塵螨過敏患者的IgE檢測屬于25kDa和14kDa兩組過敏原，國際上將這兩組最重要的過敏原組分分別命名為DerⅠ和DerⅡ過敏原。針對主要過敏原進行篩選確定和研究不僅有助于粉塵螨引發的過敏性疾病的臨床診斷、提高免疫學治療的安全性，而且有助于闡述粉塵螨的發病機理。粉塵螨引發的過敏性疾病引發的過敏性疾病包括：支氣管哮喘、過敏性鼻炎、過敏性皮膚疾病等疾病。

隨著人們生活水平的提高、生活方式的變化和環境污染,過敏性疾病的發病率普遍上升。研究發現通過減少環境中的粉塵螨數量，能有效降低兒童和青少年患過敏性疾病的危險，提高免疫治療的效果。由此為降低過敏反應的發生，就要對粉塵螨相關的指標進行嚴格干預，如粉塵螨的活體數量、粉塵螨過敏原數量等。