[發(fā)明專利]一種鏈霉菌組成型啟動子及其應(yīng)用無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210162417.9 | 申請日： | 2012-05-23 |
| 公開（公告）號： | CN103421778A | 公開（公告）日： | 2013-12-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 楊克遷;王為善;李肖;王娟 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國科學(xué)院微生物研究所 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N15/11;C12N15/76;C12P17/16;C12R1/465 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 關(guān)暢 |
| 地址： | 100101 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 霉菌 組成 啟動子 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種DNA片段，為如下1）-3）中任一所述的DNA分子：
1）序列表的序列1所示的DNA分子；
2）在嚴(yán)格條件下與1）所述DNA分子雜交且具有啟動子功能的DNA分子；
3）與1）中所述DNA分子具有90%以上同源性且具有啟動子功能的DNA分子。
2.含有權(quán)利要求1中所述DNA片段的重組載體A、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組載體，其特征在于：所述重組載體A為將權(quán)利要求1所述的DNA片段插入表達載體中得到的重組載體。
4.擴增權(quán)利要求1中所述DNA片段全長或其任意片段的引物對。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的引物對，其特征在于：所述引物對中的一條引物的核苷酸序列為序列表中的序列4，另一條引物的核苷酸序列為序列表中的序列5。
6.權(quán)利要求1所述DNA片段在使目的基因在鏈霉菌中的表達中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6中所述的應(yīng)用，其特征在于：所述鏈霉菌為天藍色鏈霉菌M145；
所述目的基因為actII-orf4，所述actII-orf4的核苷酸序列為序列表中的序列3。
8.權(quán)利要求1中所述DNA片段在制備抗生素ACT中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于：所述應(yīng)用為發(fā)酵重組菌，收集發(fā)酵液，即得到抗生素ACT；
所述重組菌為將重組載體B導(dǎo)入目的菌中，得到重組菌。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用，其特征在于：
所述重組載體B按照如下方法制備：
1）將權(quán)利要求1中所述DNA片段插入pDR4載體的BamHI和SpeI酶切位點間得到的載體C；
2）用SpeI和KpnI酶切所述載體C，回收6162?bp片段；
3）將所述6162?bp片段與所述actII-orf4片段連接，得到重組載體B；
所述目的菌為鏈霉菌，所述鏈霉菌為天藍色鏈霉菌M145。
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