[發明專利]大豆生育期e1-fs基因及其編碼蛋白

無效

• 申請號: 201210162188.0
• 申請日: 2012-05-23
• 公開（公告）號: CN102732529A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 夏正俊;翟紅;呂世翔;吳紅艷;劉寶輝;孔凡江
• 申請（專利權）人: 中國科學院東北地理與農業生態研究所
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 金永煥

技術領域

本發明涉及大豆生育期e1-fs基因及其編碼蛋白。

背景技術

E1基因位于著絲點附近，自Bernard（1971）年報道以來，人們一直沒有克隆出其功能基因。由于該基因位于近著絲點(pericentromeric?region)，遺傳重組率較低，不利于采用圖位克隆法克隆出該基因，在發明專利（一種大豆生育期E1基因及其編碼蛋白，專利申請號為：201210112662.9）中，公布出E1基因序列及其相應的蛋白序列后，證明大豆生育期E1基因具有強烈抑制大豆開花的生理功能。其蛋白質序列雖然并不能鑒定出B3結構域，但是與B3結構域基因具有遠緣的關系。B3結構域基因是一類較為保守的植物特有的轉錄因子，一般只有100-120氨基酸，常與其他結構域共同起作用。B3結構域中含有與DNA相結合的特殊位點，一般與DNA分子的大溝起作用。在含有B3結構域的蛋白質對抗逆性反應、植物的生長與發育等諸多方面起重要作用。同時，E1基因具有一個核定位信號，其特征為親核蛋白一般都含有的能保證整個蛋白質能夠通過核孔復合體被運到細胞核內的特殊的短肽氨基酸序列。在大豆栽培品種中，其E1基因的突變如何影響著大豆生育期（開花期及成熟期）是一個非常重要的科學問題，目前還沒有在分子水平上的相關研究報道。

發明內容

本發明的目的是提供大豆生育期e1-fs基因及其編碼蛋白。

本發明的大豆生育期e1-fs基因的基因序列如序列表Seq?ID?No：1所示。

本發明的大豆生育期e1-fs基因的編碼蛋白的氨基酸序列如序列表Seq?ID?No：2所示。

本發明的大豆生育期e1-fs基因是大豆生育期E1基因（發明專利申請號：201210112662.9）的突變型基因。

本發明的有益效果：

本發明是在克隆出大豆生育期E1基因（發明專利申請號：201210112662.9）的基礎上，進一步對E1基因序列進行深入系統的研究。由于在大豆中具有典型的B3基因結構域基因，本基因是代表一類新型的基因家族，我們已證實E1基因可以代表著E1位點的功能，即具有抑制大豆開花的功能。本發明對不同品種及近等基因系中E1基因序列進行了研究，并確定了e1-fs基因，其對大豆生育期關系密切。

e1-fs基因是在大豆生育期E1基因（發明專利申請號：201210112662.9）核苷酸序列48bp處發生了單堿基缺失，在AA?16至41之間形成移碼（frameshift），在第42位形成了終止子（見序列表Seq?ID?No：2）。細胞定位研究發現，該基因因移碼而造成了沒有任何信號出現在細胞核或細胞質中。具有e1-fs基因的品種表現為開花特早，在長日照條件下具有e1-fs基因的品種或品系與短日照條件下的開花天數相當，大約為30天左右，說明具有e1-fs品種幾乎喪失了對光周期的敏感性。坂本早生(Sakamotowase)及其衍生品種是具有e1-fs基因型的典型品種。

附圖說明

圖1為e1-fs基因電泳圖，其中，1號為鐵莢四粒豆，2號為長農14，3號為Kariyutaka，4號為鐵莢子，5號為長農18，6號為坂本早生(Sakamotowase)，7號為小金黃，8號為長農4；

圖2為GFP未融合e1-fs基因的瞬時表達載體結構示意圖；

圖3為GFP融合e1-fs基因的瞬時表達載體結構示意圖；

圖4為GFP未融合e1-fs基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道下的亞細胞定位影像圖；

圖5為GFP未融合e1-fs基因的激光共聚焦顯微鏡chlorophyll通道下的亞細胞定位影像圖；

圖6為GFP未融合e1-fs基因的激光共聚焦顯微鏡明視野下的亞細胞定影像位圖；

圖7為GFP未融合e1-fs基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道、chlorophyll通道與明視野融合后的亞細胞定位影像圖；

圖8為GFP融合e1-fs基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道下的亞細胞定位影像圖；

圖9為GFP融合e1-fs基因的激光共聚焦顯微鏡chlorophyll通道下的亞細胞定位影像圖；

圖10為GFP融合e1-fs基因的激光共聚焦顯微鏡明視野下的亞細胞定位影像圖；

圖11為GFP融合e1-fs基因的激光共聚焦顯微鏡GFP通道、chlorophyll通道與明視野融合后的亞細胞定位影像圖；