[發(fā)明專利]節(jié)節(jié)麥成熟胚的組織培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210161579.0
• 申請日: 2012-05-23
• 公開（公告）號: CN102668983A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭有良;江千濤;劉登才;魏育明;馬建;劉亞西;王際睿
• 申請（專利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;王加嶺

1.節(jié)節(jié)麥成熟胚的組織培養(yǎng)方法，包括種子消毒、分離成熟胚并切除胚尖、愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)、分化培養(yǎng)及生根培養(yǎng)的步驟，其特征在于，

所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)步驟中使用的AtEI培養(yǎng)基為：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加2，4-二氯苯氧乙酸、麥草畏或6-糖氨基嘌呤中的一種或多種后制成的pH值為6.0的培養(yǎng)基；所述分化培養(yǎng)步驟中使用的AtS培養(yǎng)基為：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加α-萘乙酸、6-(4羥基-3-甲基-2-反丁烯基)氨基嘌呤、6-芐氨基嘌呤、6-糖氨基嘌呤或2-羥乙基-三甲基氫氧化膽堿中的一種或多種后制成的pH值為6.0的培養(yǎng)基。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方為：

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)步驟中使用的AtEI培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基+2，4-二氯苯氧乙酸2-6mg/L+麥草畏1-5mg/L+6-糖氨基嘌呤0-1.0mg/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)步驟中使用的AtEI培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基+2，4-二氯苯氧乙酸2mg/L+麥草畏2mg/L+6-糖氨基嘌呤0.5mg/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，分化培養(yǎng)步驟中使用的AtS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基+0-1.0mg/L?α-萘乙酸+6-(4羥基-3-甲基-2-反丁烯基)氨基嘌呤1-5mg/L+6-芐氨基嘌呤0-2.0mg/L+6-糖氨基嘌呤0-1.0mg/L+2-羥乙基-三甲基氫氧化膽堿0-3.0mg/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，分化培養(yǎng)步驟中使用的AtS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基+0.5mg/L或1.0mg/L?α-萘乙酸+6-(4羥基-3-甲基-2-反丁烯基)氨基嘌呤2.0mg/L或4.0mg/L+6-糖氨基嘌呤1.0mg/L+2-羥乙基-三甲基氫氧化膽堿1.0mg/L。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，分化培養(yǎng)步驟中使用的AtS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基+0.5mg/L?α-萘乙酸+6-(4羥基-3-甲基-2-反丁烯基)氨基嘌呤4.0mg/L+6-糖氨基嘌呤1.0mg/L+2-羥乙基-三甲基氫氧化膽堿1.0mg/L。

8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)的方法為：將切除胚尖的成熟胚，按胚軸向上接種在AtEI培養(yǎng)基上，置于25°C，暗培養(yǎng)15天，得到成熟胚愈傷組織。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，分化培養(yǎng)的方法為：將成熟胚愈傷組織轉(zhuǎn)移至AtS培養(yǎng)基中，置于25°C，光照16小時/天，光照強(qiáng)度為4000-6000lux。培養(yǎng)至出苗。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，生根培養(yǎng)的方法為：將經(jīng)過分化培養(yǎng)后長出的苗轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)不定根長度達(dá)3-4cm時，將植株移入大田中培養(yǎng)。