[發明專利]肽選擇方法

有效

• 申請號: 201210156712.3
• 申請日: 2001-08-17
• 公開（公告）號: CN102764425A
• 公開（公告）日: 2012-11-07
• 發明（設計）人: D·C·弗賴斯;S·M·安德頓;G·馬扎;M·龐斯福特;H·B·斯特雷特
• 申請（專利權）人: 阿皮托普技術(布里斯托爾)有限公司
• 主分類號: A61K38/10
• 分類號: A61K38/10;A61P25/00;A61P37/02
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 梁謀;李炳愛

本申請是以下申請的分案申請：申請日：2001年8月17日；申請號：200910129672.1；發明名稱：同上。

技術領域

本發明涉及一種用于選擇耐受原性(tolerogenic)肽的方法、由該方法鑒定的肽，及其在疾病治療和/或預防中的應用。本發明還涉及含有多種此類耐受原性肽的藥物組合物。

背景技術

在適應性免疫應答中，T淋巴細胞能夠識別蛋白抗原的內部表位。抗原呈遞細胞(APC)攝取蛋白抗原，并將其降解成短肽段。肽與細胞內的I類或II類主要組織相容性復合體結合，并被運送到細胞表面。當該肽與MHC分子一同被呈遞到細胞表面時能夠被T細胞識別(通過T細胞受體(TCR))，此時，該肽可作為一種T細胞表位。

在對所有自身抗原或外源抗原的適應性免疫應答中，T細胞表位都具有主要作用。通過使用實驗模型已證明了T細胞表位在過敏性疾病(包括變態反應、自身免疫疾病和移植排異)中的重要作用。用合成的肽(根據T細胞表位的結構)結合佐劑進行注射有可能引發炎性或變應性疾病。

反之，研究表明，將可溶形式的肽表位給藥有可能導致針對特定肽表位的免疫耐受性。目前已證明，可溶性肽抗原給藥可作為一種抑制疾病的有效方法，用于實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE——多發性硬化癥(MS)的一種模型)(Metzler?and?Wraith(1993)Int.Immunol.5：1159-1165；Liu?and?Wraith(1995)Int.Immunol.7：1255-1263；Anderton?and?Wraith(1998)Eur.J.Immunol.28：1251-1261)；以及關節炎、糖尿病和色素層視網膜炎的實驗模型(見上文Anderton?and?Wraith(1998)的綜述)。此外還可作為進展性EAE疾病的治療手段(上文Anderton?and?Wraith(1998))。

耐受原性肽在治療或預防疾病中的用途已引起了相當大的關注。原因之一是已發現某些耐受原性表位能夠下調T細胞對相同組織內不同抗原的應答。這種被稱為“旁觀者(bystander)抑制”的現象說明，利用特定的耐受原性肽有可能會誘導針對特定抗原內一種以上表位(優選的是所有表位)以及特定疾病中一種以上抗原的耐受性(上文Anderton?and?Wraith(1998))。這樣就無需對特定疾病中的所有致病性抗原進行鑒定。

此外，肽是用于治療的良好選擇，因為其成本相對低廉，并且能夠產生免疫學性質不同的肽類似物。這樣就可以對肽進行修飾，以改變其與MHC或TCR的相互作用。

該方法可能存在的問題之一是，研究表明，并不是所有可充當T細胞表位的肽都能夠誘導耐受性。免疫后的髓磷脂堿性蛋白(MBP)肽89-101是一種免疫優勢抗原，并且從引發T細胞活性和誘導EAE方面來看都是一種非常有效的免疫原。但研究表明，當以溶液形式給藥時，這種肽不能誘導耐受性(上文Anderton?and?Wraith(1998))。

在T細胞表位能夠誘導耐受性方面，已針對觀測到的分級結構提出了多種解釋(見上文Anderton?and?Wraith(1998)的綜述)。具體地說，有人認為肽對MHC的親和力與其耐受原性之間存在相關性(上文Liu?and?Wraith(1995))，但該觀點與一些觀測結果不吻合。例如，MBP[89-101]能夠以相對較高的親和力與I-A^S結合，但不具有耐受原性。因而并不能直接預測哪些肽能夠誘導耐受性。

如果有一種合理的解釋來說明只有部分肽表位能夠誘導耐受性，則有助于選擇那些能夠有效地用于治療和預防過敏性病癥的耐受原性肽。

發明概述

本發明人證明，如果一種肽表位具有不經抗原加工即可被未成熟APC呈遞的適當大小，則這種肽表位能夠誘導免疫耐受性。因此，一些T細胞表位具有耐受原性而其他T細胞表位不能誘導耐受性的觀測結果可由以下事實來加以解釋，即某些表位需經過進一步加工，然后才能夠被MHC分子呈遞。這些需要進一步加工的表位盡管與佐劑協同注射時能夠誘導疾病，但是以可溶形式給藥時不能誘導耐受性。

不需要進一步加工的表位則能夠誘導耐受性，本發明人將其命名為“apitopes”(抗原加工非依賴性表位)。