[發(fā)明專利]一種南方紅豆杉胚離體成苗技術(shù)及其所用的培養(yǎng)基

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210156587.6
• 申請(qǐng)日: 2012-05-21
• 公開（公告）號(hào): CN102657091A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋麗莉;趙華強(qiáng);姜育龍;侯梅芳;張妤萍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海應(yīng)用技術(shù)學(xué)院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 吳寶根

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明南方紅豆杉胚離體成苗技術(shù)屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種南方紅豆杉胚的離體培養(yǎng)技術(shù)及其所用的培養(yǎng)基。

背景技術(shù)

南方紅豆杉(?Taxus?chinensis?var.?Maire?)，為我國特有的第三紀(jì)孑遺樹種。在自然狀態(tài)下，由于單性花、雌雄異株、異花授粉等原因，形成的種子數(shù)量較少；且種子休眠期長(zhǎng)，自然條件下需兩冬一夏才能萌芽，萌發(fā)率和幼苗成活率低；再加上其生長(zhǎng)緩慢（一棵樹成材需60年），在種群中生長(zhǎng)和競(jìng)爭(zhēng)能力弱，致使其天然分布越來越少。此外，由于南方紅豆杉具有特殊的材用和藥用價(jià)值，20世紀(jì)80年代以來其資源遭到毀滅性的破壞，現(xiàn)存資源很少，處于瀕危狀態(tài)，1992年國家林業(yè)局將其列為一級(jí)保護(hù)樹種。因此，尋找快速、有效的南方紅豆杉種苗繁殖方法對(duì)于保護(hù)和合理開發(fā)利用南方紅豆杉資源具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決上述的技術(shù)問題而提供一種南方紅豆杉胚離體成苗技術(shù)。

本發(fā)明的技術(shù)方案

一種南方紅豆杉胚離體成苗技術(shù)，即將胚直接從南方紅豆杉種子中取出，在培養(yǎng)基上進(jìn)行人工離體無菌培養(yǎng)，打破胚的休眠，促使其在當(dāng)年萌發(fā)成苗，為南方紅豆杉的大規(guī)模種植提供了快捷的途徑。具體涉及胚的剝離、胚的培養(yǎng)、煉苗及大田種植。

一種南方紅豆杉胚離體成苗技術(shù)，具體包括如下步驟：

（1）、南方紅豆杉種子胚的剝離

將南方紅豆杉種子去掉假種皮，依次用酒精、次氯酸鈉消毒,去掉堅(jiān)硬的外種皮，取出胚，并將胚在無菌水中沖洗干凈；

（2）、南方紅豆杉胚的培養(yǎng)

將步驟（1）所得的胚接種于培養(yǎng)基上，先在20-22℃條件下暗培養(yǎng)，萌發(fā)后移至光照強(qiáng)度約1500?1x，光照12h/d的光下條件進(jìn)行培養(yǎng)至根長(zhǎng)出，即得南方紅豆杉試管苗；

所用試管培養(yǎng)基配方按每升計(jì)算，由400mg?NH₄N0₃、556mg?Ca(NO₃)₂.4H₂O、990?mg?K₂SO₄、96?mg?CaCl₂.2H₂O、170?mg?KH₂PO₄、0.25?mg?Na₂MoO₄.2H₂O、370?mg?MgSO₄.7H₂O、22.4mg?MnSO₄.H₂O、8.6mg?ZnSO₄.7H₂O、0.25mg?CuSO₄.5H₂O、27.8?mg?FeSO₄.7H₂O、37.3?mg?Na₂-EDTA、100?mg肌醇、1.0mg維生素B1、0.5?mg煙酸、0.5?mg維生素B6、2.0?mg甘氨酸、0.5mg赤霉素（GA）、0.5mg吲哚乙酸（IAA）、0.5mg?6-芐基嘌呤（6-BA）、20?g蔗糖、6g瓊脂及1g活性炭和余量的水組成；

（3）、瓶?jī)?nèi)煉苗

將步驟（2）所得的南方紅豆杉試管苗置于溫度25℃、光強(qiáng)1500lx、光照12h/d、RH?80%左右的環(huán)境中，打開瓶蓋，使之適應(yīng)環(huán)境7d，即可完成瓶?jī)?nèi)煉苗；

（4）、瓶外基質(zhì)煉苗

將步驟（3）完成瓶?jī)?nèi)煉苗的試管苗取出，栽植于基質(zhì)中，所述的基質(zhì)配方按質(zhì)量比計(jì)算，即草碳:蛭石:山泥為2:2:6，煉苗室白天溫度為20-25℃，晚間為15-18℃、午間光強(qiáng)25-40klx、RH?70%?-?85%，經(jīng)25d即可完成瓶外基質(zhì)煉苗；

（5）、移栽大田

將步驟（4）完成瓶外基質(zhì)煉苗的植株種植到大田中即可。

本發(fā)明的有益效果

本發(fā)明的一種南方紅豆杉胚離體成苗技術(shù)，由于采用了將胚從種子中分離并進(jìn)行離體培養(yǎng)的技術(shù)方案，因此能夠避免胚乳中的萌發(fā)抑制物對(duì)種子萌發(fā)的抑制作用，使胚能夠在當(dāng)年萌發(fā)成苗。即解決了南方紅豆杉種子采收后需經(jīng)兩冬一夏才能自然萌發(fā)的限制，為紅豆杉種苗的快速繁殖提供了快捷的方法。

具體實(shí)施方式

下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步闡述，但并不限制本發(fā)明。

本發(fā)明的實(shí)施例中的南方紅豆杉種子采自安徽旌德廟首林場(chǎng)