[發明專利]一株Diaphorobacter菌在焦化廢水除酚中的應用

無效

• 申請號: 201210150823.3
• 申請日: 2012-05-16
• 公開（公告）號: CN103421700A
• 公開（公告）日: 2013-12-04
• 發明（設計）人: 張玉秀;柴團耀;蒙小俊
• 申請（專利權）人: 中國礦業大學(北京)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明涉及一株降解苯酚的菌株Diaphorobacter?P2，該菌株可耐重金屬Mn、Zn和Pb等，具有降解吡啶和鄰甲酚的能力，特別涉及到焦化廢水酚類有機污染物的生物處理。?

背景技術：

苯酚是重要的有機化工原料，在合成纖維、合成橡膠、石料、醫藥、農藥、香料、染料以及涂料等方面具有廣泛的應用。同時也是煤氣洗滌、煉焦、合成氨、造紙、木材防腐和化工行業廢水的主要污染物，其中煉焦產生的廢水是典型的難降解工業廢水。焦化廢水含酚類、苯系物、胺類、烷烴、喹啉等有機物，同時含有硫化物、氰化物、油類和重金屬(銅、錳、鋅、鎳、鉛、鎘等)，苯酚類及其衍生物在焦化廢水有機物質量分數中所占比例最大約為60％。苯酚屬高毒物質，對皮膚、粘膜有強烈的腐蝕作用，可抑制中樞神經或損害肝、腎功能，高濃度酚可使蛋白質凝固及引起組織損傷、壞死。由于苯酚具有致癌、致畸、致突變的潛在毒性，各國都相繼提出了把苯酚列為水中優先控制污染物。我國“水中優先控制污染物黑名單”列出的68種有毒化學污染物中也包括苯酚、間甲酚等6種酚類化合物。焦化廢水未經處理，大量排放，造成嚴重的環境污染，嚴重危害人體健康和生態環境。因此，如何有效地處理焦化廢水是環境污染防治領域迫切解決的問題。?

目前國內外處理含酚廢水的主要方法有物理、化學和生物三種途徑。生物法及其酚類生物處理主要是利用微生物的新陳代謝作用，降解水中的酚類化合物，將其轉化為無機物，使廢水得到凈化。微生物與化學、物理法相比較因處理成本低、效率高、易操作、無二次污染等優點，逐漸被重視和推廣用于處理含酚廢水。為了取得高效的生物處理效果，分離篩選高效降酚菌株處理含酚廢水已成為治理含酚廢水的必然要求。已經分離鑒定出多種降酚微生物菌株如紅球菌、克雷伯菌、嗜熱菌、芽孢桿菌、酵母菌、Corynebacterium、不動桿菌、Micrococcus、產堿桿菌、沙雷氏菌、假單胞菌等。然而，不同的降酚菌株來源不同，對不同廢水的適應性不同，在生物處理焦化廢水中的應用不多。另一方面，焦化廢水是復雜的混合體系，往往同時含有多種有機污染物和高濃度的重金屬離子，這些物質會嚴重抑制微生物對酚類的生化降解。為此，分離篩選出能降酚和多種有機污染物的耐或抗高濃度重金屬離子的菌株，對于生物處理焦化廢水具有重要的應用前景。?

發明內容：

本發明的目的在于提供一株可高效降解苯酚的菌株，為焦化廢水的治理提供理論基礎和技術支持。?

本發明人從焦化廠二次沉淀池采集活性污泥，經過富集馴化及篩選，得到一株高效降解苯酚的菌株，經鑒定該菌株16S?rDNA序列與已知Diaphorobacter?sp.16S?rDNA序列同源性為99％，命名為P2。?

本發明中，富集馴化、篩選和分離Diaphorobacter?P2菌株的過程為：取5ml搖勻的樣品廢水裝于含有100ml富集培養基的錐形瓶中置搖床中震蕩培養(37℃，180r/min)，待培養基變渾濁，在無菌操作條件下取出5ml培養基加入到含有100ml的新鮮富集培養基中培養。培養基渾濁后，取出2ml轉接到含苯酚濃度為100mg/L的新鮮富集培養基中培養，富集瓶混濁后，取2ml培養液轉接到苯酚濃度為200mg/L的液體培養基中培養。依次類推，逐級提高苯酚濃度，在300～400mg/L的條件下進行富集培養。將經過苯酚濃度為400mg/L的富集培養基富集后的菌體稀釋成10^-5、10^-6、10^-7、10^-8四個梯度，分別涂布于苯酚濃度為400mg/L的富集培養基平板上，每個稀釋度重復三次，同時倒置于生物培養箱中于30℃條件下恒溫培養。待出現菌斑后，挑取富集培養基平板上的單菌落于苯酚濃度為400mg/L的無機鹽培養基平板上反復劃線進行純化，然后將分離純化后的菌株加入到含苯酚濃度為400mg/L的無機鹽液體培養基中培養，培養基渾濁后，再依次轉接至苯酚濃度分別為400、600、800、1000mg/L的無機鹽培養基中。?