[發(fā)明專利]來(lái)自辣椒疫霉的多聚半乳糖醛酸酶PCIPG20及其編碼基因與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210143343.4
• 申請(qǐng)日: 2012-05-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102649952A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張修國(guó)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N9/26
• 分類號(hào): C12N9/26;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/11;C12P19/14
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種多聚半乳糖醛酸酶及其編碼基因與應(yīng)用，特別涉及來(lái)自辣椒疫霉的多聚半乳糖醛酸酶及其編碼基因與應(yīng)用。

背景技術(shù)

植物病原卵菌與寄主互作過(guò)程中分泌多種重要的細(xì)胞壁降解酶或致病酶，其中多聚半乳糖醛酸酶(PG：EC?3.2.1.15)是多種植物病原卵菌分泌的一種重要致病酶，該類酶通過(guò)降解寄主植物細(xì)胞壁的果膠、中膠層而破壞寄主防御體系，近而增強(qiáng)病菌對(duì)寄主的親合力，因此該類酶是一種重要的致病因子。研究表明多聚半乳糖醛酸酶是一種細(xì)胞壁結(jié)合蛋白酶，可催化果膠分子中α-（1,4）-聚半乳糖醛酸裂解，降解細(xì)胞壁的果膠，導(dǎo)致細(xì)胞壁軟化，利于病原菌的各種侵染結(jié)構(gòu)、及其分泌的各種致病酶或致病毒素順利侵染寄主組織細(xì)胞而導(dǎo)致寄主的病程發(fā)展。PG分為內(nèi)切型（endo-）和外切型(exo-)兩種，均由多基因編碼，植物病原卵菌PG基因簇成員間所編碼的多聚半乳糖醛酸酶的性能存在差異，該類酶降解寄主細(xì)胞壁的性能常由單個(gè)或幾個(gè)關(guān)鍵Pg基因協(xié)同作用。因此，探索植物病原卵菌與寄主互作過(guò)程中分泌的PG對(duì)寄主植物的致病作用，立足于致病靶標(biāo)Pg基因及其編碼的蛋白質(zhì)功能特性研究，具重要的理論和實(shí)驗(yàn)意義。

在世界范圍內(nèi)，植物病原卵菌易導(dǎo)致多種植物的病害，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的損失。資料表明PG是多種植物病原卵菌的重要致病因子，辣椒疫霉病是一種重要的卵菌病害，能導(dǎo)致多種植物發(fā)生嚴(yán)重病害，深入開(kāi)展辣椒疫霉菌（Phytophthora?capsici)多聚半乳糖醛酸酶基因分離及靶標(biāo)基因編碼的蛋白制作和功能分析具重要的實(shí)踐意義，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)于植物病原卵菌所導(dǎo)致的多種植物病害的防治與研究。

而且，多聚半乳糖醛酸酶可用于食品加工，如在果汁和酒的生產(chǎn)中，多聚半乳糖醛酸酶可用于增加果汁的產(chǎn)量，便于加壓和過(guò)濾，而且可以提高果汁和酒的透明度。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種多聚半乳糖醛酸酶。

本發(fā)明所提供的多聚半乳糖醛酸酶，名稱為PCIPG20，來(lái)源于辣椒疫霉菌（Phytophthora?capsici)的一個(gè)強(qiáng)致病菌株SD33，是如下a）或b）或c）的蛋白質(zhì)：

a）由序列表中序列2第20-360位所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

b）由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

c）將序列表中序列2所示的氨基酸序列或序列2第20-360位所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有多聚半乳糖醛酸酶活性的由a）衍生的蛋白質(zhì)。

其中，序列表中序列2由360個(gè)氨基酸殘基組成，第1-19位氨基酸組成信號(hào)肽。a）所述的蛋白質(zhì)是多聚半乳糖醛酸酶的成熟蛋白，b）所述的蛋白質(zhì)是多聚半乳糖醛酸酶的前體蛋白。

為了使上述（a）中的蛋白便于純化，可在由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標(biāo)簽。

表1?標(biāo)簽的序列