[發(fā)明專利]單增李斯特菌檢測用引物組和環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測用試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210142325.4 | 申請日： | 2008-09-16 |
| 公開（公告）號： | CN102676673A | 公開（公告）日： | 2012-09-19 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張明洲;陳宗倫;方美明;方結紅;龔云飛 | 申請（專利權）人： | 中國計量學院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州豐禾專利事務所有限公司 33214 | 代理人： | 王從友 |
| 地址： | 310018 浙江省杭*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 李斯特 檢測 引物 環(huán)介導 等溫 擴增 技術 快速 試劑盒 | ||
1.單增李斯特菌檢測用引物，其特征在于：所述的引物為一套單增李斯特菌特征性引物組，一套引物組由兩對引物組成，一對引物為外引物，一對為內引物，序列分別為：
外引物1：TTAAACGTCCGTACTGGC?
外引物2：CACTTCTTGTGTTGGTGC?
內引物1：CGTTAGATTCGGTTGTTTCAACAGTTTTAACAGTATTATTACGTCCATCAA?
內引物2：GCTGGCACAAAATTACTTACAACGATTTTTGGAGTGCTTACTGCTTTG。
2.單增李斯特菌環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括如權利要求1所述的引物組、反應液、Bst?DNA聚合酶、樣品預處理液和陽性對照液。
3.根據權利要求2所述的單增李斯特菌環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測試劑盒，其特征在于：所述的引物組由體積比為1：1：4：4的20-30μM外引物1、外引物2、內引物1與內引物2組成。
4.根據權利要求2所述的單增李斯特菌環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測試劑盒，其特征在于：所述的反應液是由體積比為5：2：1：2的10×Thermopol?反應緩沖液、?7.5～12.5mM?dNTP,?100-200mM?MgSO4與25～37.5M?甜菜堿組成。
5.根據權利要求4所述的單增李斯特菌環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測試劑盒，其特征在于：所述的10×Thermopol?反應緩沖液含有200?mM??pH8.8三羥基甲基氨基甲烷鹽酸鹽、100?mM氯化鉀、100?mM硫酸銨、20?mM硫酸鎂和體積百分比濃度為1%曲拉通X-100。
6.根據權利要求2所述的單增李斯特菌環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測試劑盒，其特征在于：Bst?DNA聚合酶每微升含8～16個活性單位。
7.根據權利要求2所述的單增李斯特菌環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測試劑盒，其特征在于：樣品預處理液是由20mM??pH?8.0??Tris-HCl?，2mM?EDTA，體積百分比濃度為1.2%曲拉通X-100組成。
8.根據權利要求2所述的單增李斯特菌環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測試劑盒，其特征在于：該試劑盒還包括顯色劑，顯色劑為熒光染料。
9.根據權利要求2所述的單增李斯特菌環(huán)介導等溫擴增技術快速檢測試劑盒，其特征在于：陽性對照液為單增李斯特菌標準菌株基因組DNA。
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