[發明專利]一種利用煙草廢料生產菌體蛋白的方法

無效

• 申請號: 201210138662.6
• 申請日: 2012-05-08
• 公開（公告）號: CN103387943A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 朱大恒;席宇
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12N1/18;C12N1/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用煙草廢料生產菌體蛋白的方法，其特征是：以煙草廢料為主要原料，發酵生產菌體蛋白，包括以下步驟：

(1)制備煙草廢料培養基；

(2)馴化、培養發酵菌種；

(3)菌體發酵；

(4)分離提取菌體蛋白。

2.根據權利要求1所述的一種利用煙草廢料生產菌體蛋白的方法，其特征是：采用液態發酵工藝，包括以下操作步驟：

(1)煙草廢料液體培養基的制備

將煙草廢料原料打碎至0.2～5cm的粒度，如果原料粒度合適，則不必打碎；加入5～100倍重量的水，于20～100℃浸提0.5～36h，使可溶物充分溶出；然后固液分離，得到煙草廢料的浸提液和固相煙草物料；固相煙草物料可進行二次或多級浸提，浸提液循環利用；殘余固相煙草物料可用作固體培養基或另作它用；浸提液適量添加營養源，pH控制在4.0～9.0，制得煙草廢料液體培養基，滅菌后備用；也可將煙草廢料原料打碎至粒度≤0.2cm的粉末狀，加入5～100倍重量的水，適量添加營養源，pH控制在4.0～9.0，即為煙草廢料液體培養基，滅菌后備用；

(2)發酵菌種的培養

斜面菌種的馴化：取步驟(1)所述煙草廢料液體培養基置于三角瓶中，接入產菌體蛋白的斜面菌種，于20～40℃條件下培養12～150h，然后轉接到相同的培養基中培養，照此方法連續轉接3～5次，將獲得的培養液稀釋后涂布到預先制備的煙草浸提液固體培養基上，煙草浸提液固體培養基是由煙草廢料液體培養基加1.9％的瓊脂制成，然后于20～45℃條件下培養20～150h，挑取大菌落在同樣的固體平板培養基上劃線，挑選單菌落轉接到固體斜面培養基，培養得到馴化菌株，保存備用；經馴化后的菌株對煙草廢料培養基質產生高度適應性，發酵性能大幅提高；

發酵種子培養：取步驟(1)所述煙草廢料液體培養基置于三角瓶中，接入經馴化的斜面菌種，于20～45℃下培養12～150h，得搖瓶種子液；根據生產規模，可進一步進行發酵種子的放大培養；

(3)菌體發酵

取步驟(1)所述煙草廢料液體培養基于發酵裝置中，接入質量分數為3％～15％的由所述步驟(2)制備的發酵種子液，于溫度20～45℃發酵20～240h，得到以干重計菌體量為≥8g/L、菌體粗蛋白的質量分數為15％～55％的發酵液；

(4)分離提取菌體蛋白

將步驟(3)得到的發酵液沉淀、過濾或離心分離，經凈化、干燥制得菌體蛋白產品。