[發明專利]用于分離培養干細胞的脂肪組織的長時間保存液

有效

• 申請號: 201210137981.5
• 申請日: 2012-05-04
• 公開（公告）號: CN103380769A
• 公開（公告）日: 2013-11-06
• 發明（設計）人: 張露億;張炳強;李玉娟;王飛;張麗;汪強;曹衛
• 申請（專利權）人: 臻景生物技術（上海）有限公司;臻景生物技術（無錫）有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02;C12N5/077;C12N5/0775
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君;雷芳

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體地，本發明涉及用于分離培養干細胞的脂肪組織的長時間保存液。

背景技術

再生醫學的興起激發了人們對各種干細胞、組織工程支架和細胞生長因子的研究熱潮，選用合適的干細胞作為種子細胞的來源已成為研究的焦點。

脂肪組織在人體內儲量豐富，獲取簡便，通過抽脂從中獲得的大量脂肪干細胞(adipos?tissue-derived?stem?cells，ADSCs)不僅在體內體外具有多化潛能，在不同的誘導因子作用下可以向脂肪細胞、軟骨細胞、肌細胞、成骨細胞、神經細胞、神經膠質細胞及胰島細胞分化，而且可以分泌多種促血管生成因子和抗凋亡因子。最新的研究發現，ADSCs作為基因治療的靶細胞具有抗炎、抗氧化的作用，有望成為臨床上用來修復受損的組織和器官的理想干細胞來源，同時也為一系列疾病的治療提供了新的思路。

自2001年Zuk等在脂肪組織中發現具有多向分化潛能的、成纖維細胞樣的干細胞以來，相繼在包括人類在內的多個物種的研究結果表明其具有多向分化能力。脂肪干細胞(adipose?tissue-derived?stem?cells，ADSCs)有望成為組織工程的“種子細胞”之一。脂肪干細胞（adipose-derived?stem?cells，ADSCs）是近年來從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的干細胞。所謂干細胞，是一群可再生、多潛力及可分化的細胞，用之可使真皮皮下脂肪及真皮再生，合并自體脂肪治療解決自體脂肪治療再吸收的問題，而且脂肪干細胞也將消除來自胚胎干細胞的倫理爭議；尤其重要的是，它的好處為來自自體，并無異體移植出現排斥的問題。

通常在醫院可以通過抽脂手術來獲得脂肪，而脂肪干細胞的獲得需要在嚴格的GMP中進行，對于不能立即進行的分離脂肪組織，為了保證分離的脂肪組織新鮮度，需要準備脂肪組織的保存液，以保證脂肪組織在運輸途中保持其生物活性，可以更好的獲得脂肪干細胞。

發明內容

本發明的目的在于提供一種脂肪組織保存液，可以長時間保存離體的脂肪組織，從保存后的脂肪組織中分離提取得到的脂肪干細胞仍具有良好的生殖能力，能夠保持其性狀和分化潛能。

本發明的第一方面，提供一種脂肪組織保存液，包括以下組分：磷酸鹽緩沖液、抗壞血酸。

在另一優選例中，所述抗壞血酸的濃度為1~10mg/ml。

在另一優選例中，所述抗壞血酸的濃度為3~7mg/ml。

在另一優選例中，所述抗壞血酸的濃度為4~6mg/ml。

在另一優選例中，所述磷酸鹽緩沖液為磷酸氫二鈉/磷酸二氫鈉緩沖液或磷酸氫二鈉/磷酸二氫鉀緩沖液。

在另一優選例中，所述磷酸鹽緩沖液的pH為7.0~7.6。

在另一優選例中，所述磷酸鹽緩沖液的pH為7.2~7.4。

在另一優選例中，所述磷酸鹽緩沖液的pH為7.4~7.6。

在另一優選例中，所示脂肪組織保存液的pH為7.0~7.6。

在另一優選例中，所述脂肪組織保存液的pH為7.2~7.4。

在另一優選例中，所述脂肪組織保存液的pH為7.4~7.6。

本發明的第二方面，提供第一方面所述的脂肪組織保存液的配制方法，包括以下步驟：

(a)配制磷酸鹽緩沖液；

(b)于步驟(a)得到的磷酸鹽緩沖液中加入抗壞血酸，混合均勻，得到所述脂肪組織保存液。

在另一優選例中，所述抗壞血酸的濃度為1~10mg/ml。

在另一優選例中，所述抗壞血酸的濃度為3~7mg/ml。

在另一優選例中，所述抗壞血酸的濃度為4~6mg/ml。

在另一優選例中，所述磷酸鹽緩沖液為磷酸氫二鈉/磷酸二氫鈉緩沖液或磷酸氫二鈉/磷酸二氫鉀緩沖液。

在另一優選例中，所述磷酸鹽緩沖液的pH為7.0~7.6。

在另一優選例中，所述磷酸鹽緩沖液的pH為7.2~7.4。

本發明的第三方面，提供第一方面所述的脂肪組織保存液的用途，所述用途選自下組：

(a)用于保存脂肪組織；

(b)用于保持或提高脂肪組織中的脂肪干細胞的活力；

(c)用于保持或促進脂肪組織中的脂肪干細胞的分化潛能。

在另一優選例中，所述用途為用于長時間保存脂肪組織。

本發明的第四方面，提供一種脂肪組織混合物，包括以下組分：

(a)脂肪組織；和

(b)第一方面所述的脂肪組織保存液。