[發(fā)明專利]一種靶向轉(zhuǎn)運microRNA的多功能磁性納米載體及制備方法和應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210137549.6
• 申請日: 2012-05-07
• 公開（公告）號: CN102631687A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王福;梁繼民;田捷;詹勇華;張象涵;陳丹
• 申請（專利權(quán)）人: 西安電子科技大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K47/48;A61K9/14;A61P35/00
• 代理公司: 西安新思維專利商標事務所有限公司 61114
• 代理人: 韓翎

1.一種靶向轉(zhuǎn)運microRNA的多功能磁性納米載體，其特征在于：所述多功能磁性納米載體的活性成分為單克隆抗體、熒光染料與microRNA轉(zhuǎn)運載體的偶聯(lián)產(chǎn)物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種靶向轉(zhuǎn)運microRNA的多功能磁性納米載體的制備方法，其特征在于，所述的制備方法為：首先制備右旋糖苷包裹的氨基化的四氧化三鐵磁性納米顆粒，然后將熒光染料與納米顆粒交聯(lián)，接著通過一個連接劑將特異性單克隆抗體連接到納米顆粒上，最后將microRNA也通過連接劑連接到納米顆粒上，最終得到可用于光學和磁共振成像的microRNA磁性納米載體。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述一種靶向轉(zhuǎn)運microRNA的多功能磁性納米載體的制備方法，其特征在于，所述的制備方法的包括以下具體步驟：

（1）采用化學共沉淀法，加入摩爾比為2:1的FeCl₃×6H₂O和FeCl₂×4H₂O,?以氨水為沉淀劑，右旋糖苷為表面活性劑，按照沉淀、陳化、純化、干燥的步驟合成右旋糖苷包裹的氨基化的磁性納米顆粒；

（2）將N-羥基琥珀酰亞胺酯活化的熒光染料與透析好的氨基化的磁性納米顆粒混勻攪拌，過柱純化后得到結(jié)合了熒光染料的磁性納米顆粒；

（3）將上述磁納米顆粒通過N-羥基琥珀酰亞胺酯與連接劑N-琥珀酰胺-3-（2-二硫哌啶）-丙酸酯（SPDP）相連，過柱純化后將單克隆抗體通過巰基活化的哌啶二硫基團反應連接到SPDP連接劑上，過柱純化后得到進一步交聯(lián)了抗體的納米顆粒；

（4）合成microRNA雙鏈核苷酸，并在有義鏈的5’?端作硫代修飾，去保護后與步驟（3）得到的納米顆粒一起4℃孵育過夜，最終得到可用于光學和磁共振成像的microRNA多功能磁性納米載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求2?所述的一種靶向轉(zhuǎn)運microRNA的多功能磁性納米載體的制備方法，其特征在于，步驟（1）所述的氧化鐵磁性納米顆粒的平均粒徑為60-90?nm,?磁飽和強度值為60-100?emu/g,?表面zeta電位30-50?mV。

5.根據(jù)權(quán)利要求3?所述的一種靶向轉(zhuǎn)運microRNA的多功能磁性納米載體的制備方法，其特征在于，步驟（2）所述的熒光染料為Cy3,?Cy5,?Cy5.5或?Cy7。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種microRNA多功能磁性納米載體在抗腫瘤及制備癌癥基因治療藥物中的應用。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種microRNA多功能磁性納米載體在實時監(jiān)測microRNA在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運途徑和對腫瘤的治療效果中的應用。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種靶向轉(zhuǎn)運microRNA的多功能磁性納米載體，其特征在于：所述microRNA轉(zhuǎn)運載體為右旋糖苷包裹的氨基化的四氧化三鐵磁性納米顆粒。