[發明專利]一種復合益生菌發酵葡萄果汁粉的制備方法

無效

• 申請號: 201210136563.4
• 申請日: 2012-05-06
• 公開（公告）號: CN103380940A
• 公開（公告）日: 2013-11-06
• 發明（設計）人: 宋明明;宋春彥;宋奕嘯;張天浩;宋迪;宋匯文;邊昱菲
• 申請（專利權）人: 黑龍江大荒春酒業有限公司
• 主分類號: A23L2/39
• 分類號: A23L2/39;A23L2/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種復合益生菌發酵葡萄果汁粉的制備方法，其特征是按下述方法制備：

1）益生菌的選擇及培養基的制備

A菌——兩歧雙歧桿菌CICC6168（Bifidobacterium??bifidum），培養基為：酪蛋白胨10g，肉湯提取物5g，酵母提取物5g，大豆蛋白胨5g，葡萄糖10g，吐溫80?1ml，K₂HPO₄?2g/L，?MgSO₄×7?H₂O?0.2g/L，?MnSO_4?x?H₂O?0.05g/L，NaCl?5g，鹽溶液?4ml，濃度為25mg/100ml刃天青4ml，蒸餾水950ml?，培養基煮至沸騰，添加半胱氨酸，調pH?至?6.8后，在CO₂下冷卻至37℃備用。?其中鹽溶液配方為：CaCl₂?×?2?H₂O?0.25g/L，?KH₂PO₄?1g/L，K₂HPO₄?1g/L，MgSO₄×7?H₂O?0.5g/L，?NaHCO₃?10g/L?，NaCl?2g/L。

B菌——副干酪乳桿菌CICC20246?(Lactobacillus?paracasei)?，培養基為：酪蛋白胨?10.0g，牛肉膏?10.0g，酵母粉?5.0g，葡萄糖?5.0g，乙酸鈉?5.0g，檸檬酸二胺?2.0g，Tween?80?1.0g，K₂HPO₄?2.0g，MgSO₄.7H₂O?0.2g，MnSO₄.H₂O?0.05g，CaCO₃?20.0g，蒸餾水?1.0L，pH6.8，經121℃滅菌20分鐘冷卻至37℃備用。

C菌——鼠李糖乳桿菌CICC6142?(Lactobacillus?rhamnosus)?，培養基為：酪蛋白胨?10.0g，牛肉膏?10.0g，酵母粉?5.0g，葡萄糖?5.0g，乙酸鈉?5.0g，檸檬酸二胺?2.0g，Tween?80?1.0g，K₂HPO₄?2.0g，MgSO₄.7H₂O?0.2g，MnSO₄.H₂O?0.05g，CaCO₃?20.0g，蒸餾水?1.0L，pH6.8，經121℃滅菌20分鐘冷卻至37℃備用。

2）原菌種活化

分別量取0.9%的生理鹽水10ml于3只試管內，經121℃滅菌20分鐘冷卻至37℃，將3株益生菌安瓶內的凍干菌粉末在無菌狀態下全部倒入0.9%的生理鹽水中，震蕩使其溶解，在37℃恒溫箱中靜止活化30分鐘，備用。

3）母發酵劑的制備

分別量取3株益生菌培養基各100ml于3只250mL三角瓶內，121℃滅菌20分鐘冷卻至37℃，按培養基體積的10%接種2）步驟中已經活化的菌種，在37℃厭氧箱內靜止培養24小時，作為母發酵劑。

4）生產發酵劑的制備

首先配制質量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液，分裝于3只500mL三角瓶內，每瓶200mL，121℃滅菌20分鐘冷卻至37℃，分別按3%體積比例接種母發酵劑，37℃厭氧培養48——54小時，檢測3株益生菌發酵液活菌數，各發酵液活菌數≥10⁹個/ml，視同為發酵成熟，如果活菌數＜10⁹個/ml，繼續培養，直至達到10⁹個/ml。

5）粉末凍干菌種的制備

將成熟的生產發酵劑在無菌條件下導入玻璃安瓶中，液面高度0.8—1cm，加蓋瓶塞后放入-30℃冰柜速凍，凍結后將玻璃安瓶用托盤盛裝，放入凍干機進行冷凍干燥，制備粉末凍干菌種。

6）復合益生菌發酵劑凍干粉的制備

按各粉末凍干菌種重量，取A菌粉末3-4份，B菌粉末1-2份，C菌粉末2-3份，充分混勻后制成復合益生菌發酵劑凍干粉，用于發酵加糖濃縮葡萄果汁，復合益生菌發酵劑凍干粉的添加量為加糖濃縮葡萄果汁中固形物重量的0.03%。

7）益生菌發酵葡萄果汁粉的制備

7.1）原料選擇：選用新鮮葡萄，剔除病爛、病蟲、生青果，用清水洗凈。?

7.2）去梗：把葡萄果粒從梳子狀的枝梗上取下來。

7.3）制取果汁：用滾筒式或離心式破碎機將果實壓破。

7.4）過濾：用板框過濾機過濾，收集清汁。

7.5）濃縮：取7.4）步驟制備的清汁100公斤，采用低溫減壓濃縮工藝濃縮至30—35公斤，按濃縮后果汁中固形物重量的2.5%添加葡萄糖，完全溶解后制成加糖濃縮葡萄果汁。

7.6）滅菌：采用142℃3秒超高溫瞬時滅菌機滅菌，冷卻至37℃等待發酵。

7.7）復合益生菌發酵：按加糖濃縮葡萄果汁中固形物重量的0.03%添加6）步驟制備的復合益生菌發酵劑凍干粉，37℃厭氧發酵60小時。

7.8）冷凍干燥

將7.7）步驟發酵處理后的物料，打入冷凍干燥機進行冷凍干燥，獲得益生菌發酵葡萄果汁粉。