[發明專利]微生物與黑麥草聯合修復垃圾堆肥重金屬滲漏體系的方法

無效

• 申請號: 201210134879.X
• 申請日: 2012-05-04
• 公開（公告）號: CN102626034A
• 公開（公告）日: 2012-08-08
• 發明（設計）人: 趙樹蘭;多立安;賈麗娜
• 申請（專利權）人: 天津師范大學
• 主分類號: A01G1/00
• 分類號: A01G1/00;A01G7/00
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 朱紅星

1.一種微生物與黑麥草聯合修復垃圾堆肥重金屬滲漏體系的方法，其特征在于按如下的步驟進行：

（1）實驗材料準備

試驗選用多年生黑麥草（Lolium?perenne?L.）為實驗材料；生活垃圾堆肥取自天津市小淀堆肥廠；供試土壤取0-20?cm深的表層土；堆肥和園土經風干后分別過2?mm篩備用；隔層材料為由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成；枯草芽孢桿菌、放線菌分離自天津小淀垃圾堆肥處理廠的生活垃圾堆肥；淋溶液：用(NH₄)₂SO₄、Na₂SO₄、K₂SO₄、MgSO₄、Ca(NO₃)₂、Mg(NO₃)₂、H₂SO₄配制出SO₄^2-、NO₃^-、Cl^-、NH⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、K⁺、Na⁺濃度分別為14.96、6.54、1.68、3.71、0.82、1.38、0.64和0.78?mg/L，并用HCl調配pH為5.5-6的淋溶液備用；

（2）實驗方法

1）草坪基質堆肥利用與隔層設置

選用PVC管直徑為7.5cm，?25cm的長管，管底部固定有直徑為0.2?mm的尼龍網以支撐管內的土和堆肥，將管吊起，管的下方配有錐形瓶接滲濾液；

2）在PVC管中裝入500g風干的園土，鋪平，再裝入水平隔層由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成，再裝入280g堆肥，鋪平于隔層之上；

3）微生物菌劑與草坪基質隔層體系的建立

將0.5?g黑麥草播于PVC管中，播種10d后，

Ⅰ中加入1.4?mL蒸餾水；

Ⅱ中加入0.7?mL牛肉膏蛋白胨培養基和0.7?mL高氏一號培養基；

Ⅲ中加入1.4?mL枯草芽孢桿菌；

Ⅳ中加入1.4?mL放線菌；

Ⅴ中加入0.7?mL液體枯草芽孢桿菌和0.7?mL液體放線菌的復合劑；

接菌后，草坪植物再生長30d，刈割，將刈割下的草坪植物地上部置于80℃的烘箱中烘干至衡重，記地上生物量；

4）刈割第二天用150?mL人工淋溶液，相當于34.0?mm的降水量，進行第一次淋洗，之后每7?d淋洗一次，每次150mL，共4次淋入600?mL，4次分別稱重，并收集于同一個錐形瓶中，混合均勻待測；其中黑麥草種植期間均用自來水澆灌，保持其整體田間持水量為60-65%；種植期間室內的溫度和相對濕度分別為14-25℃和30-55%，光照強度為350-800μmol?m^-2?s^-1；

5）利用TAS-990原子吸收分光光度計測定消化液中重金屬Cd、Cr、Cu、Pb和Ni的含量變化。

2.權利要求1所述的方法，其中沸石為天然沸石，篩取粒徑小于4mm的；蛭石取自日本弘洋園公司，取粒徑小于4mm的；鋸末取自加工廠廢棄下腳料，以上材料均80℃烘干至恒重，備用。

3.權利要求1所述的方法，其中枯草芽孢桿菌、放線菌分離的方法為：將分離出的菌種純化培養2代，取活化菌種，接入裝有50?mL液體培養基的250?mL三角瓶中，180?r/min適溫培養，用接種針挑取活化的枯草芽孢桿菌菌種，接入裝有50?mL液態的牛肉膏蛋白胨培養基的250?mL三角瓶中，180?r/min適溫培養12?h，獲得本實驗用枯草芽孢桿菌；用接種針挑取活化的放線菌菌種，接入裝有50?mL液態的高氏一號培養基的250?mL三角瓶中，180?r/min適溫培養96h，獲得本實驗用放線菌。

4.權利要求1所述方法在增加重金屬在植物體內富集阻礙Cd,?Cr,?Cu和Ni的垂直遷移方面的應用；其方法是采用0.7?mL液體枯草芽孢桿菌和0.7?mL液體放線菌的復合劑以及水平隔層由下至上分別由20g沸石、20g蛭石和20g鋸末組成隔層。