[發(fā)明專利]維生素E琥珀酸酯修飾阿霉素脂質(zhì)體的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210133509.4
• 申請日: 2012-05-02
• 公開（公告）號: CN103381144A
• 公開（公告）日: 2013-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 由國峰;何銘之
• 申請（專利權(quán)）人: 由國峰
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K31/704;A61K47/22;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種維生素E琥珀酸酯修飾阿霉素脂質(zhì)體的制備方法。

背景技術(shù)

脂質(zhì)體由于具有良好的靶向性、緩釋性、細(xì)胞親和性等優(yōu)點，已廣泛用于抗腫瘤藥物、抗寄生蟲藥物、抗結(jié)核、抗菌藥物、激素類、蛋白多肽以及基因治療藥物等的載體。然而由磷脂和膽固醇組成的脂質(zhì)體為熱力學(xué)不穩(wěn)定體系，在體內(nèi)外的穩(wěn)定性很差，嚴(yán)重限制了其臨床應(yīng)用和工業(yè)化生產(chǎn)。為此，近年來很多學(xué)者采用各種高聚物來修飾脂質(zhì)體以提高其穩(wěn)定性，取得了良好的效果。

現(xiàn)有維生素E琥珀酸酯修飾阿霉素脂質(zhì)體的制備方法復(fù)雜，不利于聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯修飾阿霉素脂質(zhì)體的工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明就是針對上述問題，提供一種易于操作、步驟簡單的維生素E琥珀酸酯修飾阿霉素脂質(zhì)體的制備方法。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案，本發(fā)明包括如下步驟：

稱取卵磷脂400mg，維生素E琥珀酸酯200mg，膽固醇100mg，用20mL乙醇超聲溶解，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸發(fā)成膜，加入0.3M硫酸銨溶液10mL，劇烈震搖使膜脫落，50℃水化2h，冰浴下用細(xì)胞破碎儀探頭超聲200次，室溫冷卻并放置4h后，轉(zhuǎn)移至透析袋中，在1000mL含10％蔗糖水溶液中室溫透析24h，用10％蔗糖的水溶液稀釋至25mL，與2mg·mL-1鹽酸阿霉素的10％蔗糖溶液等體積混合，40℃孵育1.5h。

作為一種優(yōu)選方案，本發(fā)明所述減壓蒸發(fā)的溫度為32℃。

作為另一種優(yōu)選方案，本發(fā)明所述細(xì)胞破碎儀探頭的工作功率為450w，工作時間為3s，間隔時間為3s。

本發(fā)明有益效果：本發(fā)明相比于現(xiàn)有維生素E琥珀酸酯修飾阿霉素脂質(zhì)體的制備方法，易于操作、步驟簡單。

具體實施方式

本發(fā)明包括如下步驟：

稱取卵磷脂400mg，維生素E琥珀酸酯200mg，膽固醇100mg，用20mL乙醇超聲溶解，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸發(fā)成膜，加入0.3M硫酸銨溶液10mL，劇烈震搖使膜脫落，50℃水化2h，冰浴下用細(xì)胞破碎儀探頭超聲200次，室溫冷卻并放置4h后，轉(zhuǎn)移至透析袋中，在1000mL含10％蔗糖水溶液中室溫透析24h，用10％蔗糖的水溶液稀釋至25mL，與2mg·mL-1鹽酸阿霉素的10％蔗糖溶液等體積混合，40℃孵育1.5h。

所述減壓蒸發(fā)的溫度為32℃。

所述細(xì)胞破碎儀探頭的工作功率為450w，工作時間為3s，間隔時間為3s。

精密移取阿霉素脂質(zhì)體1mL，滴入陽離子交換樹脂柱中，緩慢放出柱里面的部分水，使脂質(zhì)體與陽離子柱充分接觸，放置5min，用去離子水洗脫，收集10mL洗脫液于50mL容量瓶中，加入0.45mL濃鹽酸并用無水乙醇至刻度，以80％酸性乙醇為空白，在495nm測定波長，記作AE。另取脂質(zhì)體1mL于50mL容量瓶中，加入80％的酸性乙醇至刻度。以80％酸性乙醇為空白，在495nm測定波長，記作AT，按下式計算包封率：Encapsulation(％)＝(AT-AE)/AT100％結(jié)果測得普通的阿霉素脂質(zhì)體的包封率為98±1.33％(n＝3)；TPGS修飾的阿霉素脂質(zhì)體的包封率為95±2.15％(n＝3)采用離心法測定脂質(zhì)體懸液的穩(wěn)定常數(shù)Ke值。阿霉素脂質(zhì)體懸液以5000r·min-1離心30min，離心后的懸液在590nm下測定吸光度，記作A1；取未離心的阿霉素脂質(zhì)體，在590nm下測定吸光度，記作A0；按下式計算穩(wěn)定常數(shù)：Ke＝(A0-A1)/A1×100％，Ke值越小，脂質(zhì)體越穩(wěn)定。結(jié)果測得TPGS修飾的阿霉素脂質(zhì)體和普通阿霉素脂質(zhì)體的Ke值分別為28.7±1.6％和40.2±1.1％(n＝3)，表明TPGS修飾后可提高脂質(zhì)體的物理穩(wěn)定性。

以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實施方式對本發(fā)明作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實施只局限于這些說明，對于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明所提交的權(quán)利要求書確定的保護(hù)范圍。