[發明專利]ATRP法構建以PGMA為骨架的高性能陽離子基因載體

有效

• 申請號: 201210127021.0
• 申請日: 2012-04-26
• 公開（公告）號: CN102643374A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發明（設計）人: 徐福建;柴明英;楊鑫超;王增輝;朱韻;修可茂;胡楊
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: C08F120/32
• 分類號: C08F120/32;C08F8/32;C08F293/00;C08F220/32;C08F220/34;C08F220/54;C08F220/28;C08F299/02;C12N15/63
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 張水俤

1.一種線性的以PGEA為骨架的陽離子基因載體的制備方法，其特征在于，其具體制備步驟為：

1)0-60℃無氧條件下，將0.1g-0.2g五甲基二乙烯三胺、5g-10g四氫呋喃、6g-12g?GMA、0.08g-0.26g配體、0.033g-0.15g?CuBr混合，各組分添加順序為：先將GMA溶于四氫呋喃，然后加入五甲基二乙烯三胺，再加入配體，最后加入CuBr引發活性可控自由基聚合，或者先將GMA溶于四氫呋喃，然后加入五甲基二乙烯三胺，再加入CuBr，最后加入配體引發活性可控自由基聚合；聚合反應時間為1-9h，反應完成后加入水或者甲醇，或者暴露在空氣中，使引發體系失活和終止聚合，然后用乙醚或者甲醇沉淀直到形貌變為固體，放入真空干燥箱中除去乙醚或者甲醇，所得產物為線性PGMA；

所述的配體為2，2-聯吡啶、1，1，4，7，10，10-六甲基三乙烯四胺、五甲基二乙烯三胺、4，4-聯吡啶中的一種或幾種；

2)0-60℃無氧條件下，將0.2g-0.5g步驟1)得到的線性PGMA溶于4g-10g四氫呋喃或N-N-二甲基甲酰胺中，加入2g-4g醇胺和1g-2g三乙胺，開環反應72-168h；然后用乙醚沉淀直到產物形貌為固體，放入真空干燥箱中除去乙醚；然后將產物溶于水中，加水量與產物的比例為100-300ml/g；產物溶解后放入截留分子量為2500-4500Mw的透析袋中，在去離子水中透析3-6h；最后將透析袋中的產物冷凍干燥直至除去所有水分即得到線性的以PGEA為骨架的陽離子基因載體。

2.根據權利要求1所述的一種線性的以PGEA為骨架的陽離子基因載體的制備方法，其特征在于，步驟2)所述的醇胺為乙醇胺、2-氨基-1-丙醇、3-氨基-1-丙醇、N-N-二甲基乙二胺、胱胺中的一種或幾種。

3.一種梳狀的以PGEA為骨架的陽離子基因載體的制備方法，其特征在于，其具體制備步驟為：

1)0-60℃無氧條件下，將0.05g-0.2g五甲基二乙烯三胺、5g-10g四氫呋喃、6g-12g?GMA、0.08g-0.26g配體、0.033g-0.15g?CuBr混合，各組分添加順序為：先將GMA溶于四氫呋喃，然后加入五甲基二乙烯三胺，再加入配體，最后加入CuBr引發活性可控自由基聚合，或者先將GMA溶于四氫呋喃，然后加入五甲基二乙烯三胺，再加入CuBr，最后加入配體引發活性可控自由基聚合；聚合反應時間為1-9h，反應完成后加入水或者甲醇，或者暴露在空氣中，使引發體系失活和終止聚合，然后用乙醚或者甲醇沉淀直到形貌變為固體，放入真空干燥箱中除去乙醚或者甲醇，所得產物為線性PGMA；

2)0-60℃無氧條件下，將1.5g-2.5g步驟1)中制備的線性PGMA溶于7g-10g四氫呋喃或N-N-二甲基甲酰胺中，再加入0.36g-0.37gα-溴異丁酸；反應12-48h，優選24-48h，用乙醚沉淀直到形貌變為固體，放入真空干燥箱中除去乙醚，所得產物為PGMA-Br；

3)0-60℃無氧條件下，將0.2g-0.5g步驟2)得到的PGMA-Br、5g-10g有機溶劑、3g-6g單體、0.082g-0.15g配體、0.033g-0.1g?CuBr混合，各組分加入順序為：先將PGMA-Br溶于有機溶劑，然后加入單體，再加入配體，最后加入CuBr引發活性可控自由基聚合，或者先將PGMA-Br溶于有機溶劑中，然后加入單體，再加入CuBr，最后加入配體引發活性可控自由基聚合；反應1-500min，優選1-450min，然后加入甲醇，或者暴露在空氣中，使引發體系失活和終止聚合，最后用乙醚或者甲醇沉淀直到形貌變為固體，放入真空干燥箱中除去乙醚或甲醇，即得到梳狀的以PGMA為骨架的聚合物；所述的有機溶劑為N-N-二甲基甲酰胺或二甲基亞砜；

4)0-60℃無氧條件下，將0.1-0.5g步驟3)得到的梳狀的以PGMA為骨架的聚合物溶于5g-10g四氫呋喃或N-N-二甲基甲酰胺中，加入2g-4g醇胺和1g-2g三乙胺，開環反應72-168h；然后用乙醚沉淀直到產物形貌為固體，放入真空干燥箱中除去乙醚；然后將產物溶于水中，加水量與產物的比例為100-300ml/g；產物溶解后放入截留分子量為2500-4500Mw的透析袋中，在去離子水中透析3-6h；最后將透析袋中的產物冷凍干燥直至除去所有水分即得到梳狀的以PGEA為骨架的陽離子基因載體。