[發明專利]一種從銀杏葉提取物中脫除銀杏酸的方法

有效

• 申請號: 201210125732.4
• 申請日: 2012-04-25
• 公開（公告）號: CN102614229A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 秦勇;金春;胡傳良;段緒紅;徐成;周自桂;蘇晉
• 申請（專利權）人: 江蘇神龍藥業有限公司;江蘇誠創新藥研發有限公司
• 主分類號: A61K36/16
• 分類號: A61K36/16;B01D15/08;A61P9/10;A61P25/00;A61K127/00
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

技術領域

本發明屬于中藥制備技術領域，具體涉及一種采用大孔吸附樹脂柱層析從銀杏葉提取物中去除銀杏酸的工藝。

背景技術

銀杏是我國特有物種，資源擁有量占世界總量的70％，在我國已有六百多年的藥用歷史，同時它也是西方國家研究最多的天然植物之一。現代藥理研究表明銀杏葉提取物中的活性成分主要為銀杏黃酮類及萜類內酯類成分。可用于血瘀型胸痹及輕度腦動脈硬化引起的眩暈以及冠心病、心絞痛、心肌梗塞等疾病的治療。但目前市售的銀杏葉提取物中含有大量的銀杏酸類成分，現代毒理學研究表明，銀杏酸具有致敏性、胚胎毒性、免疫毒性和細胞毒素等的生物毒性，被認為是銀杏葉提取物中主要的毒副作用成分。

1997年，德國衛生部要求銀杏葉提取物及其制劑中銀杏酸含量小于5ppm，如果制劑不能達到這一標準，將強制取消其注冊號及銷售權。《中國藥典》2010版頒布的銀杏葉提取物標準中要求總銀杏酸含量低于10ppm。但是目前國內生產的銀杏葉提取物制劑的銀杏酸含量常常超標，甚至高達2000ppm以上(專利申請200710049086.7)，嚴重制約了銀杏葉提取物相關制劑的安全使用，因此控制成品中銀杏酸含量是保證其制劑安全性，提升產品質量必不可少的，研究去除銀杏葉提取物中銀杏酸的工藝十分必要。

目前，去除銀杏葉提取物中銀杏酸的方法有如下幾種：①，以法國Beaufour-Ipsen公司采用Schwabe公司專利為代表的丙酮提取+萃取工藝；②，歐洲有某些企業采用丙酮提取+層析+有機溶劑萃取工藝；③，乙醇提取+層析+有機溶劑萃取；④，乙醇提取+層析；⑤，超臨界萃取。專利申請(03131915.7、02113531.2、01133794.X和200610093940.5)涉及了有機溶劑萃取法脫除銀杏葉提取物中銀杏酸的工藝。但是該方法容易產生乳化而導致萃取不完全，無法保證產品質量的均一穩定，且涉及到有機溶劑殘留，同時對操作人員和環境不友好。專利申請(200710049086.7)采用聚酰胺與離子交換樹脂疊加的去除方法，能使銀杏酸含量降至5ppm以下，但是操作比較繁瑣。

發明內容

本發明的目的是提供一種操作簡單、成本低廉、可有效除去銀杏葉提取物中銀杏酚酸，而不影響銀杏總黃酮和總萜類內酯得率的方法。

實現本發明目的的技術方案是：

一種從銀杏葉提取物中脫除銀杏酸的方法，包括提取、柱層析、干燥工序，其中，所述的柱層析工序是用水調節經提取、過濾工序制得的濾液的相對密度為1.05～1.10，得到提取液，以每克樹脂加入1.5～3ml提取液的比例，通過大孔吸附樹脂交換柱，先用水洗滌，再用質量百分比濃度為60～80％的乙醇溶液洗脫，收集60～80％的乙醇洗脫液；其中，所述的大孔吸附樹脂的類型為LSA系列大孔吸附樹脂。優選大孔吸附樹脂型號為LSA-10、LSA-21或LSA-5B。

所述的濃度為60～80％的乙醇溶液的用量為15～18倍量的柱體積，乙醇溶液的洗脫速率為20～30ml/min。用水洗滌時水的用量為2～4倍量的柱體積。

上述提取、過濾工序包括以下步驟：取銀杏葉提取物加入熱水攪拌或超聲提取，過濾，合并濾液；提取次數為3～5次，每次提取時間為1～2小時。所述的熱水用量為銀杏葉提取物干重的2～3倍量，熱水的溫度在40～60℃。

所述的干燥工序是將洗脫液濃縮后在60℃以下干燥。干燥方式可以為噴霧干燥或真空干燥。

通過本發明方法制備的銀杏葉精制物中總黃酮醇苷含量35％以上，總萜類內酯含量12％以上，總銀杏酸含量低于1ppm。

本發明所指的“％”均為質量百分含量。

部分工藝參數的篩選過程如下：

試驗1、考察不同型號大孔吸附樹脂脫除銀杏葉提取物中銀杏酸的效果。

取9份100g的干燥銀杏葉提取物，分別粉碎過100目篩，加入50℃左右熱水超聲提取三次，每次時間分別均是2小時，三次熱水用量范圍是：分別為銀杏葉提取物干重的3倍，3倍，2倍，濾過，合并濾液，濾液用水調節相對密度值1.05～110得到提取液，再以每克樹脂加入2ml提取液的比例分別過不同型號的大孔樹脂柱，先分別用3倍柱體積的純化水洗滌，再分別用15倍柱體積質量百分比濃度為70％的乙醇按20ml/min速度洗脫，合并洗脫液，洗脫液濃縮，噴霧干燥，即得。

結果如表1所示：

表1