[發明專利]一種制備白花丹苷A的方法

無效

• 申請號: 201210122808.8
• 申請日: 2012-04-25
• 公開（公告）號: CN102659862A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 劉東鋒;萬冬梅
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07H15/203
• 分類號: C07H15/203;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然藥物化學領域，特別是涉及一種制備白花丹苷A的方法。

背景技術

白花丹苷A（Plumbaside?A）為酚苷類物質，CAS號126582-70-5，分子式C₁₇H₂₀O₈，分子量352.34。白花丹苷A來源于白花丹科(Plumbaginaceae)小藍雪花的全草，具有免疫促進作用，體外在濃度為100～1pg/ml時能提高T-淋巴細胞的增殖能力。

小藍雪花為白花丹科藍雪花屬落葉灌木，我國特產。分布于四川西部和西藏東部，南至云南中部，北達甘肅文縣；生于干熱河谷的巖壁和礫石或砂質基地上，多見于山麓、路邊、河邊向陽處。全株治主治：風濕麻木；脘腹脅痛；跌打損傷；骨折；脈管炎；腮腺炎。

發明內容

本發明的目的是提供一種制備白花丹苷A的方法。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

（1）取小藍雪花全草粉碎，加生物酶拌勻，常溫酶解1-3天，酶解原料用溫水浸泡提取2-3次，過濾后得到提取液；

（2）提取液用超濾膜超濾，透過液加入聚酰胺色譜柱，用乙醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮得粗提物；

（3）把上述粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測器監測，收集目標成分，減壓干燥得白花丹苷A。

步驟（1）中所述的生物酶可選纖維素酶、淀粉酶和果膠酶，用量為原料量的2-5‰。

步驟（2）中所述的超濾膜為截留分子量2000-10000的中空纖維素超濾膜。

步驟（2）中所述的聚酰胺樹脂為200-400目，乙醇水溶液濃度為60-75%，用量是3-6BV。

步驟（3）中所述的高速逆流色譜的溶劑系統為乙酸乙酯-甲醇-水，比例為45-50:1-2:47-51，下相為流動相，上相為固定相。

本發明采用生物酶發酵，可以縮短提取周期，提高提取率；采用膜過濾技術分離，物理方法除雜，操作簡單，不污染環境；采用高速逆流色譜分離，分離速度快，樣品無損失，溶劑可以循環使用，制備量大。

具體實施方式

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明。

實施例1：

取纖維酶5g溶于5L水，加入粉碎的5kg小藍雪花全草中拌勻，常溫酶解3天，酶解原料用70℃溫水浸泡提取2次，每次加40kg，提取液過濾后用截留分子量2000的中空纖維素超濾膜超濾，透過液加入200-400目聚酰胺色譜柱，用4BV60%乙醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮得粗提物20g。取乙酸乙酯、甲醇、水按45:1:47混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時開轉主機900rpm，泵入下相做流動相，待系統平衡后，流速調節為3ml/min，同時用流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器監測，收集目標流分，連續制備，合并流分減壓干燥得白色白花丹苷A2.0g，經HPLC檢測，純度98.9%。

實施例2：

取淀粉酶10g溶于5L水，加入粉碎的5kg小藍雪花全草中拌勻，常溫酶解1天，酶解原料用60℃溫水浸泡提取3次，每次加30kg，提取液過濾后用截留分子量6000的中空纖維素超濾膜超濾，透過液加入200-400目聚酰胺色譜柱，用6BV65%乙醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮得粗提物12g。取乙酸乙酯、甲醇、水按50:2:51混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時開轉主機800rpm，泵入下相做流動相，待系統平衡后，流速調節為2ml/min，同時用流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器監測，收集目標流分，連續制備，合并流分減壓干燥得白色白花丹苷A2.5g，經HPLC檢測，純度98.1%。

實施例3：

取淀粉酶5和果膠酶10g溶于5L水，加入粉碎的5kg小藍雪花全草中拌勻，常溫酶解1天，酶解原料用60℃溫水浸泡提取3次，每次加30kg，提取液過濾后用截留分子量6000的中空纖維素超濾膜超濾，透過液加入200-400目聚酰胺色譜柱，用3BV70%乙醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮得粗提物12g。取乙酸乙酯、甲醇、水按50:1:50混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時開轉主機850rpm，泵入下相做流動相，待系統平衡后，流速調節為2.5ml/min，同時用流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器監測，收集目標流分，連續制備，合并流分減壓干燥得白色白花丹苷A2.7g，經HPLC檢測，純度98.7%。

實施例4：