[發(fā)明專利]發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法及其用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210122462.1
• 申請日: 2012-04-24
• 公開（公告）號: CN102643327A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王偉明;陳麗艷;曹思思;王昶;方自若
• 申請（專利權(quán)）人: 黑龍江省中醫(yī)研究院
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C12P21/06;A61K38/16;A61K38/01;A61P19/10
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 韓末洙

1.發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法，其特征在于發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法如下：

一、按照質(zhì)量與體積比為1g∶2～10mL的比例將發(fā)酵黃瓜籽粉加入到有機(jī)溶劑中，在室溫超聲提取20～60min或者在0～20℃浸泡18～24h，過濾，棄去濾液，將濾渣干燥，得到脫脂干燥的發(fā)酵黃瓜籽粉；

二、按照質(zhì)量與體積比為1g∶4～20mL的比例將脫脂干燥的發(fā)酵黃瓜籽粉加入到pH值為4.0～9.0的醋酸-醋酸鈉緩沖液或pH值為4.0～9.0的磷酸鹽緩沖液中，在4℃攪拌2～4h或者在4℃浸泡24～36h，然后以3000～6000轉(zhuǎn)/分的速度離心，取上清液，將上清液經(jīng)過分子量50000道爾頓的超濾膜超濾，再經(jīng)過10000道爾頓的超濾膜超濾，濃縮濾液，冷凍干燥或噴霧干燥，即得發(fā)酵黃瓜籽多肽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法，其特征在于步驟一中所述的有機(jī)溶劑為石油醚、正己烷或乙醚。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法，其特征在于步驟一中按照質(zhì)量與體積比為1g∶8mL的比例將發(fā)酵黃瓜籽粉加入到有機(jī)溶劑中。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法，其特征在于步驟二中在10℃浸泡18～24h。

5.發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法，其特征在于發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法如下：

一、按照質(zhì)量與體積比為1g∶2～10mL的比例將發(fā)酵黃瓜籽粉加入到有機(jī)溶劑中，在室溫超聲提取20～60min或者在0～20℃浸泡18～24h，過濾，棄去濾液，將濾渣在40℃以下干燥，得到脫脂干燥的發(fā)酵黃瓜籽粉；

二、按照質(zhì)量與體積比為1g∶2～5mL的比例將脫脂干燥的發(fā)酵黃瓜籽粉加入水中，再加入復(fù)合酶，復(fù)合酶用量為脫脂干燥的發(fā)酵黃瓜籽粉質(zhì)量的1％～4％，在pH值為6～8、溫度為40～60℃的條件下，定向酶解4～10h，然后在80～90℃保溫5～20min，在3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下離心，收集上清液，得到小肽液；

三、將小肽液經(jīng)10000道爾頓的超濾膜超濾，濃縮濾液，冷凍干燥或噴霧干燥，即得發(fā)酵黃瓜籽多肽。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法，其特征在于步驟一中所述的復(fù)合酶為胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及中性蛋白酶中的兩種或三種按任意比例組成。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法，其特征在于步驟一中所述的有機(jī)溶劑為石油醚、正己烷或乙醚。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述發(fā)酵黃瓜籽多肽的制備方法，其特征在于步驟一中按照質(zhì)量與體積比為1g∶8mL的比例將發(fā)酵黃瓜籽粉加入到有機(jī)溶劑中。

9.權(quán)利要求1所述發(fā)酵黃瓜籽多肽，其特征在于所述發(fā)酵黃瓜籽多肽用于預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松。

10.權(quán)利要求5所述發(fā)酵黃瓜籽多肽，其特征在于所述發(fā)酵黃瓜籽多肽用于預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松。