[發明專利]一種乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖及其在提高IEC抗菌肽表達水平中的應用

無效

• 申請號: 201210122033.4
• 申請日: 2012-04-24
• 公開（公告）號: CN102702373A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 劉思國;黎觀紅;賈永杰;洪智敏;司微;于申業
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所;江西農業大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12N5/071;C12Q1/68
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨

1.一種乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖，其特征在于所述的完整肽聚糖是從鼠李糖乳桿菌MLGa(Lactobacillus?rhamnosus?MLGa)中提取得到的，所述的鼠李糖乳桿菌MLGa保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其菌種保藏編號為：CGMCC?No.5957。

2.權利要求1所述的乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖在制備提高雞小腸上皮細胞抗菌肽AvBD9表達水平制劑中的應用。

3.一種提高雞小腸上皮細胞抗菌肽AvBD9表達水平的方法，其特征在于包含以下步驟：將權利要求1所述的乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖與雞小腸上皮細胞共培養，以提高抗菌肽AvBD9基因的表達水平。

4.根據權利3要求所述的方法，其特征在于乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖的濃度為50μg/ml。

5.根據權利3所要求所述的方法，其特征在于乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖與雞小腸上皮細胞共培養的時間為4小時。

6.雞小腸上皮細胞表面受體TLR₂在介導乳酸桿菌或乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖增強雞小腸上皮細胞抗菌肽AvBD9基因表達中的應用。

7.一種檢測TLR₂介導乳酸桿菌或乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖增強雞小腸上皮細胞抗菌肽AvBD9基因表達相關性的方法，其特征在于包括以下步驟：以乳酸桿菌、熱滅活乳酸桿菌和乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖WPG刺激雞小腸上皮細胞，用熒光定量PCR方法檢測其TLR₂mRNA的表達變化；采用特異性抗體封閉雞小腸上皮細胞的TLR₂，吸去封閉液，加入乳酸桿菌、熱滅活乳酸桿菌和乳酸桿菌細胞壁完整肽聚糖WPG刺激細胞，用熒光定量PCR方法檢測抗菌肽AvBD9mRNA的變化。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于抗體稀釋倍比為100倍。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于采用特異性抗體和雞小腸上皮細胞于37℃共同孵育40分鐘封閉雞小腸上皮細胞的TLR₂。