[發(fā)明專利]一種超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210119607.2
• 申請(qǐng)日: 2012-04-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102866256A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韋勝富;李曉;孫海江;王建東;李淮彬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市希萊恒醫(yī)用電子有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
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• 代理人: 暫無(wú)信息

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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫檢測(cè)，具體涉及一種超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑。

背景技術(shù)

1930年，Tillett和Francis首次在急性大葉性肺炎患者的血清中發(fā)現(xiàn)一種能在Ca2+存在時(shí)與肺炎球菌細(xì)胞壁中的C－多糖發(fā)生特異性沉淀反應(yīng)的物質(zhì)。?1941年Avery等測(cè)知它是一種蛋白質(zhì)，故稱為C反應(yīng)蛋白(CRP)。?C反應(yīng)蛋白是一類正急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，隨著損傷、炎癥或各類疾病迅速增加。

常規(guī)C反應(yīng)蛋白檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)范圍3mg/L—350mg/L，目前超敏C反應(yīng)蛋白試劑盒最寬的檢測(cè)范圍是1mg/L—350mg/L，還可以繼續(xù)優(yōu)化，讓超敏C反應(yīng)蛋白能檢測(cè)到更低含量。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)的上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑。

本發(fā)明的超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)方法，其特征是，包括以下步驟：

（1）測(cè)試多個(gè)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液，建立濃度與散射值的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)；

（2）將標(biāo)準(zhǔn)曲線制作成試劑的測(cè)試卡，在特定蛋白分析儀上刷卡后即把標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)錄入儀器計(jì)算軟件，通過(guò)測(cè)試樣本的散射值后通過(guò)計(jì)算可以得到樣本的濃度結(jié)果。

其中，步驟（1）測(cè)試多個(gè)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液，建立濃度與散射值的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)的操作為：①用處理稀釋液將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成多個(gè)不同濃度；②將多個(gè)已知不同濃度的C反應(yīng)蛋白標(biāo)準(zhǔn)品分別與緩沖液R1試劑混勻制得抗原標(biāo)準(zhǔn)液，然后將乳膠抗體R2試劑加入抗原標(biāo)準(zhǔn)液、同時(shí)用特定蛋白分析儀測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品散色值，從而建立散射值-濃度對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)；③測(cè)定待檢樣品的散色值：用處理稀釋液按測(cè)試要求稀釋待檢樣品，將稀釋樣本與緩沖液R1試劑混勻制得抗原液，然后將乳膠抗體R2試劑加入抗原液、同時(shí)用特定蛋白分析儀測(cè)定待檢樣品的散色值；④查詢C反應(yīng)蛋白濃度：將③步驟測(cè)定的散色值與散射值-濃度數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)照，查詢得知C反應(yīng)蛋白濃度。

所述處理稀釋液試劑包括如下組分：SDS?0.1%、疊氮鈉0.12%.

所述緩沖液R1試劑包括如下組分：NaCl?0.9%、Tirs?1.2%、Na₂CO_3?0.06%；

所述乳膠抗體R2試劑包括如下組分：羊抗人C反應(yīng)蛋白抗體致敏的苯乙烯乳膠0.6%、甘氨酸1.1%、碳酸鈉0.1%、碳酸氫鈉0.1%；

本發(fā)明所述超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)試劑，該檢測(cè)試劑包含處理稀釋液、緩沖液R1試劑、乳膠抗體R2試劑，其中，處理稀釋液包含SDS?0.1%～0.５％、疊氮鈉0.12%～0.4%，試劑R1包含?NaCl?0.9%～2.1%、Tirs?1.2%～2.5%、Na₂CO_3?0.06%～0.1%；試劑R2包含羊抗人C反應(yīng)蛋白抗體致敏的苯乙烯乳膠0.2%～0.7%、甘氨酸1.1%～2%、碳酸鈉0.1%～0.9%、碳酸氫鈉0.1%～0.9%；

優(yōu)選地，所述處理稀釋液試劑包括如下組分：SDS?0.1%、疊氮鈉0.12%；

所述緩沖液R1試劑包括如下組分：NaCl?0.9%、Tirs?1.2%、Na₂CO_3?0.06%；

所述乳膠抗體R2試劑包括如下組分：羊抗人C反應(yīng)蛋白抗體致敏的苯乙烯乳膠0.6%、甘氨酸1.1%、碳酸鈉0.1%、碳酸氫鈉0.1%。

該檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑檢測(cè)速度快，特異性高，可以在特定蛋白分析儀上檢測(cè)體液，特別是血液中微量生物化學(xué)物質(zhì)，檢測(cè)范圍為0.4mg/L-350mg/L，擴(kuò)大了超敏C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)范圍。

附圖說(shuō)明

????圖1是散射值與濃度的曲線圖。

具體實(shí)施方式

以下提供本發(fā)明的一些優(yōu)選實(shí)施例，以助于進(jìn)一步理解本發(fā)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于這些優(yōu)選實(shí)施例。

實(shí)施例1

?以靜脈全血為樣本測(cè)試超敏C反應(yīng)蛋白，包括如下步驟：?