[發明專利]一種海洋雙菌共固定化體系的構建和造紙廢水處理的方法

有效

• 申請號: 201210119413.2
• 申請日: 2012-04-23
• 公開（公告）號: CN102757951A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發明（設計）人: 姚善涇;陳慧英;馮曉雨;林東強
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N11/02
• 分類號: C12N11/02;C02F3/34;C12R1/80;C12R1/645;C02F103/28
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高

1.一種海洋雙菌共固定化體系的構建和造紙廢水處理的方法，其特征在于它的步驟如下：

1）海洋微紫青霉菌菌絲球的制備：

將保存于4℃的海洋微紫青霉菌固體斜面取出，用無菌水制成濃度為ｎ=10⁶～10⁹mL^-1的孢子懸液，以3～5%的接種量接入含100mL菌絲球培養基的500mL錐形瓶中，于160～180rpm/min,26～30℃下搖床培養4～5天，然后用水將多余的菌絲體洗去，過濾收集菌絲球，放入冰箱備用，菌絲球培養基的組成為：葡萄糖10～15g/L，酒石酸銨2～3g/L，KH₂PO₄?2～3g/L，MgSO₄·5H₂O?0.5～1.0g/L，酵母提取物2～3g/L，pH?4.0～5.0，海洋微紫青霉菌保藏在中國典型培養物保藏中心，地址為中國.武漢.武漢大學，保藏日為2012年1月11日，分類命名Penicillium?janthinellum?CP1，保藏號為CCTCC?M?2012006；

2）固定化菌絲球制備：

首先，用100mL預先滅過菌的蒸餾水制備濃度為1.0～3.0×10⁹/mL的海洋內生擬盤多毛孢菌孢子懸浮液，用于接種；接著，取5～10g海洋微紫青霉菌菌絲球，接種于含有固定化培養基的三角瓶中；然后，用移液管移取10mL海洋內生擬盤多毛孢菌孢子懸浮液接種于上述已經接有海洋微紫青霉菌菌絲球的三角瓶中，使得海洋內生擬盤多毛孢菌孢子懸浮液的最終濃度為1.0～3.0×10⁸/mL；最后，海洋內生擬盤多毛孢菌孢子和海洋微紫青霉菌菌絲球在含有固定化培養基的三角瓶中共固定化生長1～3天，培養結束后，用水將多余的菌絲體洗去，過濾收集菌絲球，放入冰箱備用，固定化培養基的組成為：葡萄糖20～30g/L，酒石酸銨4～6g/L，KH₂PO₄?4～6g/L，MgSO₄·5H₂O?0.5～1.0g/L，酵母提取物2～3g/L，pH?4.0～5.0；

3）固定化菌絲球用于造紙廢水的處理

稱取2～5g固定化菌絲球，加入到含有100mL按1：4稀釋的造紙廢水的250mL三角瓶中振蕩處理6～10h，轉速140～160rpm,溫度28-30℃，以不加固定化菌絲球的處理為空白對照，在相同的條件下處理，廢水處理效果用生物降解率Y％來表征，即：

其中，A₁為處理結束后空白對照測得的濁度；A₂為處理結束后樣品測得的濁度，本發明結果表明，用固定化菌絲球對造紙廢水進行6～10h的振蕩處理，生物降解率可達96-99%。?