[發明專利]蠟楊梅酸A的高效分離純化方法

無效

• 申請號: 201210118964.7
• 申請日: 2012-04-23
• 公開（公告）號: CN102643325A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發明（設計）人: 劉東鋒;郭琴
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然物質的提取技術領域，涉及蠟楊梅酸A的高效分離純化方法。

背景技術

蠟楊梅酸A（Myriceric?acid?A）分子式為C₃₉H₅₂O₇，分子量為632.84。分子結構式為：

。

蠟楊梅酸A為三萜類化合物，無色片狀結晶（甲醇-水8:2），mp.211-213℃。是從楊梅科植物蠟楊梅Myrica?cerifera?L.小枝中分離得到，藥理研究表明，蠟楊梅酸A具有內皮素受體（ETA）拮抗活性，在大鼠主動脈平滑肌細胞（A7r5）中，抑制內皮素與A7r5的結合，IC₅₀為0.04μg/mL；抑制內皮素誘導的Ca²⁺移動的IC₅₀為0.0075μg/mL。

現有技術中，尚未檢索到大量提取制備蠟楊梅酸A的工藝報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種蠟楊梅酸A的高效分離純化方法，本發明的目的通過以下技術方案來實現：

蠟楊梅酸A的高效分離純化方法，其特征在于包括以下步驟：

A.取蠟楊梅藥材粉碎，用5-10倍量的丙酮溶液浸漬，滲漉提取，至滲漉液顏色變淺，收集滲漉液；

B.將滲漉液加硅藻土脫色，過濾，減壓回收丙酮，得濃縮液；

C.將濃縮液注入大孔吸附樹脂柱層析，吸附、洗脫后減壓濃縮干燥得粗提取物；

D.將粗提取物加入去離子水，微沸狀態下提取，過濾，所得沉淀物加乙醇溶解，堿調pH至10-11，過濾，濾液加稀鹽酸調pH至3-4，靜置結晶；

E.將結晶用甲醇溶解重結晶得到蠟楊梅酸A產品。

步驟B中所述硅藻土加入量為總液體量的3-5%。

步驟C中所述大孔吸附樹脂為XAD-1、NKA、XSD-3、SP825中的一種。

步驟C中所述大孔吸附樹脂柱層析洗脫劑為50%-80%乙醇溶液。

本發明的優點在于：本發明工藝簡單、成本低、適合工業化生產。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

取蠟楊梅藥材粉碎，用5倍量的丙酮浸泡2小時，然后裝入滲漉桶中，繼續加入丙酮溶液以5ml/min流速開始滲漉提取，至滲漉液顏色變淺，收集滲漉液，將滲漉液加5%的硅藻土攪拌脫色，過濾，減壓回收丙酮，將濃縮液注入SP825大孔吸附樹脂柱層析，吸附，50%乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮干燥得粗提取物；將粗提取物加入去離子水，微沸狀態下提取1小時，過濾，所得沉淀物加乙醇溶解，氨水調pH至10.5后過濾，所得濾液加稀鹽酸調pH至3.3，靜置結晶，將結晶用甲醇溶解重結晶得到蠟楊梅酸A產品，HPLC分析其純度為95.7%。

實施例2：

取蠟楊梅藥材粉碎，用8倍量的丙酮浸泡2.5小時，然后裝入滲漉桶中，繼續加入丙酮溶液以4ml/min流速開始滲漉提取，至滲漉液顏色變淺，收集滲漉液，將滲漉液加3%的硅藻土攪拌脫色，過濾，減壓回收丙酮，將濃縮液注入XAD-1大孔吸附樹脂柱層析，吸附，65%乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮干燥得粗提取物；將粗提取物加入去離子水，微沸狀態下提取1.5小時，過濾，所得沉淀物加乙醇溶解，氨水調pH至10.2后過濾，所得濾液加稀鹽酸調pH至3.5，靜置結晶，將結晶用甲醇溶解重結晶得到蠟楊梅酸A產品，HPLC分析其純度為96.4%。

實施例3：

取蠟楊梅藥材粉碎，用6倍量的丙酮浸泡1.5小時，然后裝入滲漉桶中，繼續加入丙酮溶液以3ml/min流速開始滲漉提取，至滲漉液顏色變淺，收集滲漉液，將滲漉液加5%的硅藻土攪拌脫色，過濾，減壓回收丙酮，將濃縮液注入NKA大孔吸附樹脂柱層析，吸附，80%乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮干燥得粗提取物；將粗提取物加入去離子水，微沸狀態下提取1.5小時，過濾，所得沉淀物加乙醇溶解，氨水調pH至11后過濾，所得濾液加稀鹽酸調pH至3.4，靜置結晶，將結晶用甲醇溶解重結晶得到蠟楊梅酸A產品，HPLC分析其純度為95.3%。

實施例4：

取蠟楊梅藥材粉碎，用10倍量的丙酮浸泡1小時，然后裝入滲漉桶中，繼續加入丙酮溶液以5ml/min流速開始滲漉提取，至滲漉液顏色變淺，收集滲漉液，將滲漉液加4%的硅藻土攪拌脫色，過濾，減壓回收丙酮，將濃縮液注入XSD-3大孔吸附樹脂柱層析，吸附，70%乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮干燥得粗提取物；將粗提取物加入去離子水，微沸狀態下提取1小時，過濾，所得沉淀物加乙醇溶解，氨水調pH至10.2后過濾，所得濾液加稀鹽酸調pH至3.8，靜置結晶，將結晶用甲醇溶解重結晶得到蠟楊梅酸A產品，HPLC分析其純度為96.1%。