[發(fā)明專利]杏黃兜蘭的繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210118941.6
• 申請(qǐng)日: 2012-04-23
• 公開（公告）號(hào): CN102630464A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 嚴(yán)寧;張娟娟;胡虹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院昆明植物研究所
• 主分類號(hào): A01G1/00
• 分類號(hào): A01G1/00
• 代理公司: 昆明協(xié)立知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 53108
• 代理人: 馬曉青

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種兜蘭屬(Paphiopedilum)杏黃兜蘭(P.armeniacum?S.C.Chen?et?F.Y.Liu)種子繁殖方法。

技術(shù)背景：

兜蘭屬(Paphiopedilum)隸屬于蘭科杓蘭亞科(Cypripedioideae)，目前總共有79個(gè)野生種類記錄在案，其中約1/3產(chǎn)自中國。就種類而言，中國是世界上兜蘭屬植物最為豐富的國家，總種類達(dá)到27種(劉仲健等，2009)。兜蘭屬的顯著特征之一即為唇瓣特化成兜狀或拖鞋狀，故又稱“拖鞋蘭”或“仙履蘭”(羅毅波等，2005)。蘭科兜蘭屬植物(Paphiopedilum)以花形奇特，花色艷麗而享譽(yù)世界，豐富的花色和盛長的花期而廣受蘭花愛好者及園藝學(xué)家的關(guān)注與喜愛，具有巨大的觀賞價(jià)值和市場價(jià)值。

杏黃兜蘭(P.armeniacum?S.C.Chen?et?F.Y.Liu)是產(chǎn)于我國的兜蘭原生種之一，主要生長于云南西部，如碧江、瀘水、保山等地海拔1400-2100米的石灰?guī)r壁積土處或多石而排水良好的北坡上。是兜蘭屬中罕見的黃花種類，其花色純黃，葉子具斑紋而被譽(yù)為“金兜”，是兜蘭中最引人注目的種類之一，與硬葉兜蘭(P.micranthum)并稱為“金童玉女”，一直受到人們的廣泛關(guān)注。80年代杏黃兜蘭在國際市場上的售價(jià)達(dá)到上百美元一株，到1992年為止，其已在美國蘭展會(huì)上70多次奪得大獎(jiǎng)，是兜蘭中著名觀賞種。鑒于此種情況，杏黃兜蘭的野外種群被過度采集，受到嚴(yán)重破壞，再加上近年來生境破壞，其瀕危程度加劇，因此利用人工繁育方法提高杏黃兜蘭種苗繁殖率是解決杏黃兜蘭保護(hù)及商業(yè)化開發(fā)的重要技術(shù)。

目前對(duì)于杏黃兜蘭常用的繁育方法是利用種子進(jìn)行無菌萌發(fā)，從而獲得實(shí)生苗。然而，杏黃兜蘭的種子在成熟后萌發(fā)通常十分困難(Arditti，1982；Rasmussen，1995)。現(xiàn)有技術(shù)未解決杏黃兜蘭種子萌發(fā)最佳時(shí)期的技術(shù)問題，未提供一種杏黃兜蘭高效人工繁殖的方法和技術(shù)體系。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的上述問題，提供了一種杏黃兜蘭種子繁殖的方法，利用形態(tài)解剖方法并結(jié)合種子無菌萌發(fā)技術(shù)，對(duì)杏黃兜蘭種子發(fā)育過程進(jìn)行觀察，分析萌發(fā)率較高時(shí)的種子形態(tài)特征，依賴確定杏黃兜蘭種子萌發(fā)率最高時(shí)的最佳時(shí)間，選擇此期間的種子進(jìn)行播種，從而克服種子萌發(fā)困難的技術(shù)難題，為建立杏黃兜蘭高效人工繁殖技術(shù)體系提供了技術(shù)基礎(chǔ)。

本發(fā)明的上述目的是通過下述的技術(shù)方案加以實(shí)現(xiàn)的：

杏黃兜蘭的繁殖方法，包括定植、授粉、確定種子最佳萌發(fā)時(shí)間并播種，所述定植是將杏黃兜蘭成年植株定植，所述授粉是在杏黃兜蘭開花時(shí)將其唇瓣去除，將位于雄蕊上的花粉粒取下，涂抹到雌蕊柱頭上進(jìn)行人工授粉，所述確定種子最佳萌發(fā)時(shí)間并播種是在杏黃兜蘭授粉時(shí)標(biāo)記時(shí)間，將授粉50天后的杏黃兜蘭種子在顯微鏡下觀察，確定出杏黃兜蘭種子的最佳萌發(fā)時(shí)間時(shí)進(jìn)行播種。

上述的杏黃兜蘭的繁殖方法，所述定植是將杏黃兜蘭成年植株定植于實(shí)驗(yàn)溫室中，其栽培條件為日溫25℃，夜溫18℃，光照強(qiáng)度300μmol?m^-2s^-1，光照時(shí)間12h，相對(duì)濕度為60％，每10天澆一次水，同時(shí)每30天施以自配的含有氮、磷、鉀1∶1∶1的營養(yǎng)液一次。

上述的杏黃兜蘭的繁殖方法，所述確定杏黃兜蘭種子最佳萌發(fā)時(shí)間是將授粉50天后的杏黃兜蘭種子固定在改良的FAA固定液中，利用GMA混合液包埋聚合，通過切片，在顯微鏡下觀察，當(dāng)種子胚發(fā)育的形態(tài)學(xué)特征表現(xiàn)為原胚體積增大，幾乎充滿整個(gè)胚囊，形成橢球形胚，胚柄由呈直線型排列的2-3個(gè)細(xì)胞組成時(shí)為杏黃兜蘭最佳萌發(fā)時(shí)間。

上述的杏黃兜蘭的繁殖方法，所述改良FAA固定液其配方是38％的甲醛即福爾馬林5ml，冰醋酸5ml，50％的酒精90ml。