[發明專利]一種制備葉下珠斯泰丁A的方法

無效

• 申請號: 201210118933.1
• 申請日: 2012-04-23
• 公開（公告）號: CN102659857A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 劉東鋒;郭琴
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07H13/08
• 分類號: C07H13/08;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于中藥化學技術領域，涉及一種制備葉下珠斯泰丁A的方法。

背景技術

葉下珠斯泰丁A（Phyllanthostatin?A）是一種木脂素類化合物，分子式為C₂₉H₃₀O₁₃，分子量為586.55，為無定性固體，mp.127-130℃。主要存在于大戟科漸尖葉下珠Phyllanthus?acuminatus?Vahl.的根中、不齊淺裂葉下珠Phyllanthus?anisolvbus的葉和枝中。藥理學研究表明葉下珠斯泰丁具有細胞抑制活性，體外抑制PS白血病細胞生長，ED₅₀為4μg/mL。

目前對葉下珠斯泰丁A的研究較少，因此提供一種葉下珠斯泰丁A的制備方法對含有葉下珠斯泰丁A的藥材資源開發及藥理研究具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種操作簡單、制備量大、純度高，適合工業化生產的制備葉下珠斯泰丁A的方法。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種制備葉下珠斯泰丁A的方法，其特征在于包括以下步驟：

A.提取：取富含葉下珠斯泰丁A的藥材粉碎，依次用70-90%丙酮和75-95%乙醇滲漉提取，合并提取液，濃縮成浸膏，得提取液浸膏；

B.萃取：將上述提取液浸膏用正丁醇萃取，萃取液進行濃縮得浸膏；

C.柱層析：將上述浸膏用中性氧化鎂拌樣上柱，石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液；

D.制備液相純化：將石油醚-丙酮（3:1）洗脫液濃縮干燥，用制備液相色譜分離純化，流速為20-50ml/min，流動相為甲醇-乙腈-水（18:35:47）。

所述步驟C中，氧化鎂目數為100-200目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5-8bar，柱徑高比為1:7-10。

本發明的有益效果是：采用本發明方法，操作簡單、制備量大、得率高、產品純度高，適合工業化生產。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1：

取漸尖葉下珠根粉碎，先用70%的丙酮滲漉提取，再用85%乙醇滲漉提取，合并丙酮提取液和乙醇提取液，減壓濃縮得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，濃縮得萃取浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱（柱壓為6bar，柱徑高比為1:7），用石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，將石油醚-丙酮（3:1）洗脫液濃縮、干燥，得粗品。將粗品用制備高效液相色譜分離純化，流速為20ml/min，流動相為甲醇-乙腈-水（18:35:47），紫外檢測器在線監測，針對性收集葉下珠斯泰丁A的制備流分溶液，減壓回收試劑得葉下珠斯泰丁A，含量為96.7%。

實施例2：

取漸尖葉下珠根粉碎，先用80%的丙酮滲漉提取，再用90%乙醇滲漉提取，合并丙酮提取液和乙醇提取液，減壓濃縮得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，濃縮得萃取浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱（柱壓為5bar，柱徑高比為1:10），用石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，將石油醚-丙酮（3:1）洗脫液濃縮、干燥，得粗品。將粗品用制備高效液相色譜分離純化，流速為40ml/min，流動相為甲醇-乙腈-水（18:35:47），紫外檢測器在線監測，針對性收集葉下珠斯泰丁A的制備流分溶液，減壓回收試劑得葉下珠斯泰丁A，含量為95.5%。

實施例3：

取漸尖葉下珠根粉碎，先用90%的丙酮滲漉提取，再用95%乙醇滲漉提取，合并丙酮提取液和乙醇提取液，減壓濃縮得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，濃縮得萃取浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱（柱壓為8bar，柱徑高比為1:9），用石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，將石油醚-丙酮（3:1）洗脫液濃縮、干燥，得粗品。將粗品用制備高效液相色譜分離純化，流速為50ml/min，流動相為甲醇-乙腈-水（18:35:47），紫外檢測器在線監測，針對性收集葉下珠斯泰丁A的制備流分溶液，減壓回收試劑得葉下珠斯泰丁A，含量為96.2%。

實施例4：

取漸尖葉下珠根粉碎，先用75%的丙酮滲漉提取，再用75%乙醇滲漉提取，合并丙酮提取液和乙醇提取液，減壓濃縮得提取浸膏，用正丁醇萃取4次，合并正丁醇萃取液，濃縮得萃取浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱（柱壓為7bar，柱徑高比為1:8），用石油醚-丙酮按體積比20:1-3:1進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液，將石油醚-丙酮（3:1）洗脫液濃縮、干燥，得粗品。將粗品用制備高效液相色譜分離純化，流速為30ml/min，流動相為甲醇-乙腈-水（18:35:47），紫外檢測器在線監測，針對性收集葉下珠斯泰丁A的制備流分溶液，減壓回收試劑得葉下珠斯泰丁A，含量為95.8%。