[發明專利]一種檢測參芪扶正注射液中大分子物質的方法

有效

• 申請號: 201210116801.5
• 申請日: 2012-04-13
• 公開（公告）號: CN102680642A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 蘇薇薇;林鋒;王永剛;彭維;劉學華
• 申請（專利權）人: 麗珠集團利民制藥廠;中山大學
• 主分類號: G01N31/22
• 分類號: G01N31/22
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢驗參芪扶正注射液大分子物質的方法，該方法包括如下步驟：

(1)采用超濾離心法對中藥注射注射液超濾離心處理，并在超濾離心后的上層截留液部分加入超純水，混勻后離心，直至洗出部分用Molish反應檢測呈陰性，收集上層截留液；

(2)采用BCA法和Molish法檢測步驟(1)獲得的上層截留液，以確定所述中藥注射注射液否存在大分子物質。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，使用的超濾離心管優選為Millipore?Ultra-153.0KD-3.8KD。

3.根據權利要求1或2所述的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，每次超濾離心后的上層截留液體積為150μl-250μl。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，加入超純水的次數優選為8-10次。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述大分子物質是指參芪扶正注射液中的大分子蛋白和大分子多糖。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括如下步驟：

(1)精密吸取參芪扶正注射液10ml置于Millipore?Ultra-153.0KD-3.8KD超濾離心管中，5000轉離心至上層截留液剩余體積為150μl-250μl，往上層截留液加入超純水5ml，用移液槍吹打混勻后，再次離心至上層截留液剩余體積為150μl-250μl，重復加水8～10次，每次2ml，每次加水后都要充分混勻再離心，直至下層洗出部分用Molish反應檢測陰性，收集上層截留液，定容至10ml；

(2)采用BCA法檢測注射注射液否含有大分子的蛋白質，具體方法為：使用BCA蛋白試劑盒，于96孔板中加入20μl樣品液及200μlBCA工作液，37℃放置30min，觀察是否有紫色絡合物出現；采用Molish法檢測注射注射液否含有大分子的多糖物質，具體方法為：小試管中加入1ml樣品液和兩三滴Molish試液，搖勻，沿管壁慢慢加入1ml濃硫酸，觀察兩層液面交界處是否有紫色環的出現。