[發明專利]一種紫菜類菌胞素氨基酸Porphyra-334的制備方法

有效

• 申請號: 201210114628.5
• 申請日: 2012-04-18
• 公開（公告）號: CN102659621A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 張朝輝;高昕;許志恒;許加超
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C07C251/20
• 分類號: C07C251/20;C07C249/02
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

技術領域

本發明涉及一種紫外線吸收物質(類菌胞素氨基酸)，特別是涉及一種紫菜類菌胞素氨基酸(Porphyra-334)的提取制備方法。

背景技術

紫菜是我國的一種重要經濟藻類，年產75萬噸，紫菜中含有多種營養成分，深受消費者喜愛。紫菜是紅藻，其中含有多種類菌胞素氨基酸，而且含量比較豐富。類菌胞素氨基酸(MAAs)是海藻中含有的一類小分子的紫外線吸收物質，為水溶性化合物，由于共軛雙鍵和側鏈上不同活性基團的影響，在310-360nm的紫外光區具有吸收能力，它們具有極高的摩爾吸光系數，是最強的天然紫外線吸收物質。這類化合物在食品、化妝品及其他產業中具有很大的潛在工業應用價值。Porphyra-334是類菌胞素氨基酸的一種，在334nm處有最大吸收值，摩爾吸收光系數為ε₃₃₄＝4.23×10⁴M¹cm¹，Porphyra-334在海藻中分布很廣，也是紫菜中主要的類菌胞素氨基酸。

目前從海藻中制備類菌胞素氨基酸(Porphyra-334)主要有兩種方法，一種是通過極性溶液提取之后采用高效液相色譜法(HPLC)制備，一種是采用甲醇溶液提取后，經過簡單純化后，再使用SephadexG10、DEAE?Sephadex?A-25、Narit?A、CM?Sephadex?C-25等多種硅膠柱進行純化，這兩種方法得率低，產量很少，適合在實驗室中制備純化Porphyra-334，但都不能應用于大量的制備類菌胞素氨基酸(Porphyra-334)。

發明內容

本發明的目的是提供一種紫菜類菌胞素氨基酸的制備方法，即一種低成本大量制備Porphyra-334的方法，從而彌補現有技術的不足。

本發明的方法，包括如下的步驟：

1)首先將紫菜進行粉碎，然后加入到1～10倍紫菜重量的、pH為1～5的鹽酸水溶液中進行浸泡；浸泡結束后，將浸泡液進行過濾得到濾液；并將殘渣用1～5倍殘渣重量的、pH為1～5的鹽酸水溶液進行浸泡清洗、過濾，過濾后的清洗液和濾液合并得到清液；

2)在步驟1)的清液中加入體積分數為50～100％的乙醇溶液進行沉淀，并進行過濾；再將上清液低溫濃縮后，得到類菌胞素氨基酸粗品溶液；

3)將步驟2)制備的粗品溶液通過陰離子交換樹脂進行吸附，吸附結束后，采用NaOH溶液進行洗脫；將洗脫液低溫濃縮后，再通過陽離子交換樹脂進行吸附；吸附結束后，用pH2～5的鹽酸溶液進行洗脫，最后將洗脫液低溫干燥后得到類菌胞素氨基酸Porphyra-334。

上述步驟1)中用1～10倍(重量比)的pH1～5的鹽酸水溶液進行浸泡，是浸泡2個小時。

上述步驟3)中將粗品溶液通過陰離子交換樹脂進行吸附，是將粗品溶液在4～40℃通過陰離子交換樹脂以50～500mL/h流速進行吸附。

用0.01N的NaOH溶液進行洗脫，洗脫流速為1～10mL/min。

上述步驟3)中的通過陽離子交換樹脂進行吸附，是在4～40℃通過陽離子交換樹脂以50～500mL/h的流速進行吸附，吸附結束后，用pH2～5的鹽酸溶液洗脫，洗脫流速為1～10mL/min。

本發明采用工業大生產的離子交換樹脂，通過控制類菌胞素氨基酸在樹脂上的吸附和解析過程，能夠大量制備具有高純度的類菌胞素氨基酸Porphyra-334，能夠滿足工業生產的要求。

具體實施方式

實施例1：類菌胞素氨基酸(Porphyra-334)粗品提取

取20g的粉碎紫菜，用20g～200g(重量比)的pH1～5的鹽酸水溶液在20℃分別提取0.5、1、1.5、2、2.5、3、4小時，過濾，殘渣(約18g)用1～5倍(重量比18～90g)的pH1～5的鹽酸水溶液清洗，過濾后合并清液。在清液中加入清液體積5倍的50～100％的乙醇溶液沉淀，過濾之后，清液經過低溫濃縮，得到的類菌胞素氨基酸粗品溶液。

通過對類菌胞素氨基酸(Porphyra-334)的提取率的分析表明，提取2小時已經基本提取完全，再延長提取時間，提取率沒有明顯變化。

實施例2：通過陰離子交換樹脂進行純化

取50mL的粗品溶液在4～40℃通過陰離子交換樹脂D284(南開大學化工廠產，也可以采用其它廠家的、不同型號的產品)，以50～500mL/h的流速進行吸附，吸附結束后，采用0.005、0.01、0.15、0.2、0.3、0.4N的NaOH溶液進行洗脫，洗脫流速為1～10mL/min，洗脫液低溫濃縮。