[發明專利]一種食甲醇芽孢桿菌及其煙用升麻浸膏的制備方法和應用

無效

• 申請號: 201210114009.6
• 申請日: 2012-04-18
• 公開（公告）號: CN102618475A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 羅誠浩;魏敏;宋旭艷;陳義坤;李冉
• 申請（專利權）人: 湖北中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A24B3/12;C12R1/07
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 馬輝

1.一種食甲醇芽孢桿菌，該菌株名為Bacillus?methylotrophicus?VJ4-1，保藏編號CCTCC?NO：M?2012004，食甲醇芽孢桿菌Bacillus?methylotrophicus?CCTCC?NO：M?2012004的生物學特征是：是革蘭氏陽性菌，能在10％NaCl中生長，有精氨酸雙水解酶、鳥氨酸脫羧酶活性，能產酸、使牛奶液化；能以N-乙酰葡萄糖胺、甘露醇、葡萄糖、水楊素、D-蜜二糖、D-核糖、肌醇、蔗糖、麥芽糖、D-山梨醇、L-阿拉伯糖、DL-乳酸鹽、L-丙氨酸糖原、L-脯氨酸組氨酸、檸檬酸鹽為碳源的培養基上生長，其16S?rRNA序列與Bacillus?methylotrophicus的16S?rRNA序列比對相似性達到100％。

2.一種利用食甲醇芽孢桿菌生物轉化煙用升麻浸膏的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將升麻粉碎至10～200目，與水按質量比1∶20～40回流提取1～3小時后過濾，將濾液滅菌；

2)斜面培養：將食甲醇芽孢桿菌接種到馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養基上，在25～35℃、pH5～10條件下，靜置培養24～72小時后置于冰箱中；

3)制備種子培養液：用上述步驟2)中所得的斜面培養物，接種到種子培養基，在25～35℃，轉速100～150rpm條件下振蕩培養12～36h，連續轉接1～4次后制得種子培養液；

4)發酵：將種子培養液按體積比5～20％接種到上述步驟1)中的升麻濾液中形成發酵液，上述發酵液的裝罐量為20～40％，在pH4～10，溫度25～40℃，轉速100～200rpm，不避光條件下發酵7～14天；

5)將步驟4)中所得的發酵液和95％乙醇按體積比1∶3～4，沉淀過夜后抽濾，將濾液減壓濃縮除去溶劑，制得相對密度為1.20～1.36的煙用升麻浸膏。

3.根據權利要求2所述的一種利用食甲醇芽孢桿菌生物轉化煙用升麻浸膏的制備方法，其特征在于，所述斜面培養基為：馬鈴薯浸液200mL/L，葡萄糖20g/L，瓊脂13g/L。

4.根據權利要求2所述的一種利用食甲醇芽孢桿菌生物轉化煙用升麻浸膏的制備方法，其特征在于，所述種子液培養基組成為：麥芽糖50g/L，蛋白胨10g/L，氯化鈉5g/L。

5.一種根據權利要求2所得煙用升麻浸膏的應用，其特征在于：所述煙用升麻浸膏加入卷煙中，用于協調煙氣、增加淡甜花香、豐富香氣、使煙氣柔和舒適、余味好，加入卷煙中煙用升麻浸膏的質量比為0.01～0.05％。